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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE中上样缓冲液中加入DTT是什么作用
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE中上样缓冲液中加入DTT是什么作用

如题，哪位大侠能给解释下上样缓冲液中DTT的作用啊，加与不加DTT在SDS-PAGE中有什么区别？！
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1楼 2012-08-13 17:03:28
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lou87

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-08-14 13:41:47
是一种强还原剂，能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，而sds可以破坏蛋白质的二三级结构，二者使蛋白质呈线性，忽略电荷因素，其迁移率可看成与分子大小成正比。如果未加DTT，则蛋白质的线性多肽链未完全打开，其分子空间结构也会影响迁移率 。
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3楼2012-08-13 17:52:47
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yingyangyang

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-14 13:41:36
DTT是二硫苏糖醇，是一种强还原剂，作用类似于巯基乙醇。但是毒性比巯基乙醇低，但是价格贵。主要作用是防止DNA二聚化！
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2楼2012-08-13 17:15:19
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飘零的叶子

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lou87 at 2012-08-13 17:52:47
是一种强还原剂，能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，而sds可以破坏蛋白质的二三级结构，二者使蛋白质呈线性，忽略电荷因素，其迁移率可看成与分子大小成正比。如果未加DTT，则蛋白质的线性多肽链未完全打开，其分子空间 ...

请问您有做过上样缓冲液中不加DTT的SDS-PAGE么？影响很大吗？
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4楼2012-08-13 19:36:57
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scutphoenix

木虫 (正式写手)
★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
很大，之前做个PDGF，一种二聚体蛋白，加了就是单体，不加就是二聚体，大小很明显呀
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5楼2012-08-13 21:58:02
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