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SDS-PAGE中上样缓冲液中加入DTT是什么作用
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飘零的叶子
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SDS-PAGE中上样缓冲液中加入DTT是什么作用
如题,哪位大侠能给解释下上样缓冲液中DTT的作用啊,加与不加DTT在SDS-PAGE中有什么区别?!
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2012-08-13 17:03:28
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飘零的叶子
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3楼
:
Originally posted by
lou87
at 2012-08-13 17:52:47
是一种强还原剂,能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,而sds可以破坏蛋白质的二三级结构,二者使蛋白质呈线性,忽略电荷因素,其迁移率可看成与分子大小成正比。如果未加DTT,则蛋白质的线性多肽链未完全打开,其分子空间 ...
请问您有做过上样缓冲液中不加DTT的SDS-PAGE么?影响很大吗?
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2012-08-13 19:36:57
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2012-08-14 13:41:36
DTT是二硫苏糖醇,是一种强还原剂,作用类似于巯基乙醇。但是毒性比巯基乙醇低,但是价格贵。主要作用是防止DNA二聚化!
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2012-08-13 17:15:19
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★ ★ ★ ★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流
2012-08-14 13:41:47
是一种强还原剂,能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,而sds可以破坏蛋白质的二三级结构,二者使蛋白质呈线性,忽略电荷因素,其迁移率可看成与分子大小成正比。如果未加DTT,则蛋白质的线性多肽链未完全打开,其分子空间结构也会影响迁移率 。
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2012-08-13 17:52:47
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★
飘零的叶子(金币+1): 谢谢参与
很大,之前做个PDGF,一种二聚体蛋白,加了就是单体,不加就是二聚体,大小很明显呀
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2012-08-13 21:58:02
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