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allegro1741

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2801
散金: 17
帖子: 95
在线: 38.2小时
虫号: 1617000
注册: 2012-02-14
性别: GG
专业: 发育生物学

[求助] Q-PCR和RT-PCR结果不一致呢？

做了两次定量（Q）-PCR，一个基因的转录量都是降低的，可每次做半定量（RT）-PCR结果又显示升高，这是怎么回事？半定量的cDNA也经过稀释，不存在饱和现象...

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1楼2012-08-13 15:05:27

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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

应助: 34 (小学生)
金币: 8.4
红花: 1
帖子: 298
在线: 115.3小时
虫号: 1310932
注册: 2011-05-30
性别: GG
专业: 植物病理学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

实时定量PCR和半定量PCR二者的精确度是不一样的，所以不相同很正常啊，半定量PCR的误差比较大，现在也有做的，但用的比较少了。实施荧光定量PCR受cDNA的浓度和质量影响也比较大，所以要保证你的模板质量没有问题。多做几次吧，看趋势就好了。

4楼2012-08-15 08:54:39

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