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兔宝LL

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒大提,摇菌时间过久对提取的质粒有影响吗?

质粒大提,说明书要求:300rpm,12-16h(第二次扩培)

然后,摇的时候,为了和摇床里其他同学的菌的转速同步,我设了250rpm,摇了大概18h-19h,取出后感觉很浑浊,应该是摇老了,请问这样对提出的质粒有影响吗?
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-10 13:50:12
菌都老了,提出的质粒浓度不会提高,还可能因为蛋白降解的不充分,影响质粒的纯度和浓度。建议还是重新摇吧
共同学习,共同进步,共同提高,加油!
3楼2012-08-10 09:25:36
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-10 13:49:56
兔宝LL: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-08-14 02:40:48
有影响,但对不同质粒影响不同,一般对大质粒影响大,小质粒影响不大。对大肠杆菌影响要比农杆菌小很多。菌老化,提出的质粒量不一定大,而且杂质较多,酶切验证不容易切完全。
2楼2012-08-10 05:35:58
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兔宝LL

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-10 05:35:58
有影响,但对不同质粒影响不同,一般对大质粒影响大,小质粒影响不大。对大肠杆菌影响要比农杆菌小很多。菌老化,提出的质粒量不一定大,而且杂质较多,酶切验证不容易切完全。

我是大肠杆菌
4楼2012-08-14 02:41:06
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兔宝LL

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xuexue1204 at 2012-08-10 09:25:36
菌都老了,提出的质粒浓度不会提高,还可能因为蛋白降解的不充分,影响质粒的纯度和浓度。建议还是重新摇吧

哦,先试试吧,谢谢!
5楼2012-08-14 02:42:19
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