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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒大提，摇菌时间过久对提取的质粒有影响吗？
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兔宝LL

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒大提，摇菌时间过久对提取的质粒有影响吗？

质粒大提，说明书要求：300rpm,12-16h(第二次扩培）

然后，摇的时候，为了和摇床里其他同学的菌的转速同步，我设了250rpm，摇了大概18h-19h,取出后感觉很浑浊，应该是摇老了，请问这样对提出的质粒有影响吗？
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1楼2012-08-10 01:43:40
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-10 13:49:56
兔宝LL: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-08-14 02:40:48
有影响，但对不同质粒影响不同，一般对大质粒影响大，小质粒影响不大。对大肠杆菌影响要比农杆菌小很多。菌老化，提出的质粒量不一定大，而且杂质较多，酶切验证不容易切完全。
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2楼2012-08-10 05:35:58
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-10 13:50:12
菌都老了，提出的质粒浓度不会提高，还可能因为蛋白降解的不充分，影响质粒的纯度和浓度。建议还是重新摇吧
赞一下 回复此楼
共同学习，共同进步，共同提高，加油！
3楼2012-08-10 09:25:36
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兔宝LL

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-10 05:35:58
有影响，但对不同质粒影响不同，一般对大质粒影响大，小质粒影响不大。对大肠杆菌影响要比农杆菌小很多。菌老化，提出的质粒量不一定大，而且杂质较多，酶切验证不容易切完全。

我是大肠杆菌
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4楼2012-08-14 02:41:06
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兔宝LL

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuexue1204 at 2012-08-10 09:25:36
菌都老了，提出的质粒浓度不会提高，还可能因为蛋白降解的不充分，影响质粒的纯度和浓度。建议还是重新摇吧

哦，先试试吧，谢谢！
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5楼2012-08-14 02:42:19
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fenggou82

金虫 (正式写手)
菌老了 自己感觉做什么都不好
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lovemyfamilyforever
6楼2012-08-14 09:50:42
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