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czcpudai

铜虫 (正式写手)

应助: 12 (小学生)
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虫号: 1626622
注册: 2012-02-19
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] RT-PCR没有出现内参基因的条带和目的条带，请问是什么原因？

最近在做RT-PCR，两步法的。结果RNA的质量还是可以，三条带明显，5s比较浅，但是没有目的条带和内参的基因的出现，pcr用的是Taq酶，扩增的片段是350bp，280bp，360bp，三种基因条带，结果没有出现任何带，用1.8%琼脂糖凝胶电泳。我想向大家请教一下是不是用的Taq酶保真性不高所致？还是模板质量还是不高？还是用琼脂糖电泳跑小片段不合适，用聚丙烯酰胺比较合适呢？？？

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1楼2012-08-09 19:56:11

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dongyanqutao

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 普通语言学

【答案】应助回帖

您好，我的实验中也出现了这种情况，请问你是怎么解决的，还有你问的怎样确定反转录的问题有答案了吗，希望你能帮我分析一下，谢谢了

8楼2013-01-27 16:15:47

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