24小时热门版块排行榜    

查看: 4732  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

allegro1741

新虫 (小有名气)


[交流] Q-PCR的CT值是在30之前可靠么?

我做一个基因的定量Q-PCR,结果两次增加的程度不一样,头一次经过10倍稀释的CT值超过了30,第二次没有稀释CT值低于30,导师说第一次的超过30了就不可靠,不知道大家是不是以此作为一种标准来判断自己的实验结果的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
allegro1741: 金币+3 2012-08-09 17:40:08
呵呵,不打明白你的研究内容,你也没介绍清楚。我讲的只是大致原理。qPCR也算是各种期刊愿意接受的数据,所以只要你按照qPCR MIQC来做,是没有问题的。
4楼2012-08-09 12:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

shenye.judy

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
allegro1741(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-09 14:22:44
扩增次数越多,越有可能有非特异性产物。所以我们常规的PCR都是30个。q-PCR,本身就对引物的设计要求较高,并且为了更宽范围的定量,就放到40个。
如果你确定你的产物没有非特异性扩增(主要看溶解曲线或者跑胶结果),那么40个也是准的。
有不少taqman方法的文献,最后数据分析的时候用的是35个循环之前的数据,虽然实验的时候都做40个。
2楼2012-08-07 16:13:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allegro1741

新虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-08-07 16:13:43
扩增次数越多,越有可能有非特异性产物。所以我们常规的PCR都是30个。q-PCR,本身就对引物的设计要求较高,并且为了更宽范围的定量,就放到40个。
如果你确定你的产物没有非特异性扩增(主要看溶解曲线或者跑胶结果 ...

那两次实验的结果差异太大了,一次增加6倍多,一次只增加了两倍多,增加的样品也不是同一个(前者是处理后48h的,后者是处理后24h的),以CT为30为标准来选择某个数据也并不准确啦?
3楼2012-08-07 18:52:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanle159

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-08-09 12:46:26
呵呵,不打明白你的研究内容,你也没介绍清楚。我讲的只是大致原理。qPCR也算是各种期刊愿意接受的数据,所以只要你按照qPCR MIQC来做,是没有问题的。

请问下,什么是qPCR MIQC?
6楼2014-08-19 19:35:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +9 一鸭鸭哟 2026-03-14 11/550 2026-03-19 17:22 by !本暗一次!
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +3 llllkkkhh 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:22 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
信息提示
请填处理意见