应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Q-PCR的CT值是在30之前可靠么？
71/1返回列表
查看: 5176  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

allegro1741

新虫 (小有名气)

[交流] Q-PCR的CT值是在30之前可靠么？

我做一个基因的定量Q-PCR，结果两次增加的程度不一样，头一次经过10倍稀释的CT值超过了30，第二次没有稀释CT值低于30，导师说第一次的超过30了就不可靠，不知道大家是不是以此作为一种标准来判断自己的实验结果的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-08-07 15:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
allegro1741(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-09 14:22:44
扩增次数越多，越有可能有非特异性产物。所以我们常规的PCR都是30个。q-PCR，本身就对引物的设计要求较高，并且为了更宽范围的定量，就放到40个。
如果你确定你的产物没有非特异性扩增（主要看溶解曲线或者跑胶结果），那么40个也是准的。
有不少taqman方法的文献，最后数据分析的时候用的是35个循环之前的数据，虽然实验的时候都做40个。
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-07 16:13:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

allegro1741

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-08-07 16:13:43
扩增次数越多，越有可能有非特异性产物。所以我们常规的PCR都是30个。q-PCR，本身就对引物的设计要求较高，并且为了更宽范围的定量，就放到40个。
如果你确定你的产物没有非特异性扩增（主要看溶解曲线或者跑胶结果 ...

那两次实验的结果差异太大了，一次增加6倍多，一次只增加了两倍多，增加的样品也不是同一个（前者是处理后48h的，后者是处理后24h的），以CT为30为标准来选择某个数据也并不准确啦？
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-07 18:52:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
allegro1741: 金币+3 2012-08-09 17:40:08
呵呵，不打明白你的研究内容，你也没介绍清楚。我讲的只是大致原理。qPCR也算是各种期刊愿意接受的数据，所以只要你按照qPCR MIQC来做，是没有问题的。
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-09 12:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanle159

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-08-09 12:46:26
呵呵，不打明白你的研究内容，你也没介绍清楚。我讲的只是大致原理。qPCR也算是各种期刊愿意接受的数据，所以只要你按照qPCR MIQC来做，是没有问题的。

请问下，什么是qPCR MIQC？
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-19 19:35:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bwangel

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
在考虑到一系列可能出现的误差的情况下，30以前的我们考虑，30以后的怀疑可能会不准，
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-20 06:56:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
涌动的泉5楼
2012-08-09 14:32   回复  
allegro1741(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 allegro1741 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-31 03:18 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-31 02:45 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 8/400 2026-08-31 02:45 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-31 01:59 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-31 01:27 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:21 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:19 by l0VvVHGBGRLv
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭