| 查看: 1708 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
77638333金虫 (著名写手)
|
[求助]
请问Real time q PCR一定要做融解曲线吗？
|
||
| 有没有具体的protocol？谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有283人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- real time PCR 溶解曲线 目的产物后又出一个峰 怎么回事
已经有5人回复
- Real-time PCR
已经有4人回复
- 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！
已经有12人回复
- 荧光定量扩增曲线与融解曲线分析
已经有9人回复
- 帮我看看这个溶解qPCR曲线
已经有6人回复
- 请教real time pcr问题，谢谢！
已经有10人回复
- real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗？
已经有4人回复
- 关于real-time PCR温度优化的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】real time PCR如何去掉杂峰
已经有11人回复
- 【求助/交流】做realtime-PCR，退火温度很重要吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】今天做的Rea Time PCR怎么看不到融解曲线？是不是前面设置出现了问题？
已经有8人回复
- 【求助/交流】Real time PCR 熔点曲线求助，谢谢
已经有12人回复
- 【专题】评价一下您用的Real-Time PCR仪器
已经有26人回复
- 【专题】real time pcr目的基因的融解曲线不明白
已经有8人回复
77638333
金虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1804.7
- 散金: 450
- 红花: 8
- 沙发: 1
- 帖子: 1312
- 在线: 205.3小时
- 虫号: 568699
- 注册: 2008-06-04
- 专业: 核技术及其应用
5楼2012-08-02 17:03:25
chenguestc
木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 576 (博士)
- 贵宾: 0.4
- 金币: 4526.9
- 散金: 1639
- 红花: 176
- 帖子: 4708
- 在线: 353.5小时
- 虫号: 1337860
- 注册: 2011-07-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
77638333: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢。qPCR参数已经有了。融解曲线的protocols能否详细一些？ 2012-08-01 22:25:14
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极热心的帮忙解答问题 2012-08-02 15:29:35
感谢参与，应助指数 +1
77638333: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢。qPCR参数已经有了。融解曲线的protocols能否详细一些？ 2012-08-01 22:25:14
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极热心的帮忙解答问题 2012-08-02 15:29:35
|
是的。溶解曲线是必须做的。 我们常用到的qPCR supplies 及用量（1个反应，20ul体系）如下，楼主可根据这个用量适量调整： TBSYBRmix 10 ul PrimerF (10uM) 0.6 ul PrimerFR (10uM) 0.6 ul cDNA (20ng/ul) 2 ul Reference dye 0.4 ul ddH2O 6.4 ul PCR条件： 95度 1min 40x 95度 15s 60度 45s 最后，melt curve 95度 15s 60度 45s 95度 15s 可适当调整。 |
2楼2012-08-01 22:10:17
chenguestc
木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 576 (博士)
- 贵宾: 0.4
- 金币: 4526.9
- 散金: 1639
- 红花: 176
- 帖子: 4708
- 在线: 353.5小时
- 虫号: 1337860
- 注册: 2011-07-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
3楼2012-08-02 07:47:42
lixc2009
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 602.6
- 散金: 9
- 帖子: 76
- 在线: 23小时
- 虫号: 1188951
- 注册: 2011-01-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-02 15:29:49
77638333: 金币+1, ★有帮助, 谢谢啦 2012-08-02 17:04:15
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-02 15:29:49
77638333: 金币+1, ★有帮助, 谢谢啦 2012-08-02 17:04:15
|
溶解曲线只是PCR仪的其中之一的功能，我在做PCR时有的会用到，有的不需要做，看你做什么实验。分享下我的PROTOCOLS: 预变性： 95℃ 5min *1 PCR ： 95℃ 10s 60℃ 15s *50 72℃ 25s HRM ： 95℃ 1min 40℃ 1min *1 65℃ 1s 95℃ 检测荧光 COOLING: 40℃ 10S 希望对你有帮助！！ |
4楼2012-08-02 09:37:38
