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黄小妹儿

铜虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱冲洗问题

实验所用柱子前一次用的流动中有磷酸,但上次未用高浓度的水冲洗,现在是觉得柱子太脏,想冲干净,所用方法:先100%甲醇冲1小时,后乙腈冲1.5h,基线平后,换到100%甲醇(此时再次出现杂质峰),基线平后,用90%的甲醇冲洗时,又出现很多峰,且基线一直未平,现不知是何原因(或者我们这种冲柱子的方法是否也存在问题),请各位大侠指点,谢谢
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youlandaling

铁杆木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你可以先用常规清洗,若不行再在常规清洗的基础上结合一下冲洗程序看看情况:
1,2为常规分析程序
3.20倍柱体积IPA
4.20倍柱体积正己烷或氯仿
5.20倍柱体积IPA
6.20倍柱体积MeOH/ACN
柱体积:V=0.68πr2L
r-内径(cm) L-长度(cm)
21楼2012-08-31 16:59:10
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普通回帖

dingsmile

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-07-20 21:51:33
不知道 你这是毛细管电色谱柱 还是液相色谱柱 ,电色谱柱可以用手动泵用水冲洗隔夜再用,效果比较好
学无止境
2楼2012-07-20 16:02:53
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黄小妹儿

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dingsmile at 2012-07-20 16:02:53
不知道 你这是毛细管电色谱柱 还是液相色谱柱 ,电色谱柱可以用手动泵用水冲洗隔夜再用,效果比较好

是液相色谱柱的,C18柱
3楼2012-07-20 16:19:27
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-07-20 21:51:41
你是有磷酸还是磷酸盐呀?有盐的话最好是要用不含盐的流动相进行冲洗色谱柱,还有,冲洗的时候一般是按20-30倍柱体积为好,而不是按时间的。
4楼2012-07-20 16:31:38
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黄小妹儿

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yugijiang at 2012-07-20 16:31:38
你是有磷酸还是磷酸盐呀?有盐的话最好是要用不含盐的流动相进行冲洗色谱柱,还有,冲洗的时候一般是按20-30倍柱体积为好,而不是按时间的。

只是磷酸。我们现在一直在冲柱子,总是换一个比例就会出很多峰,请问这是咋回事呢。谢谢
5楼2012-07-20 17:02:37
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-07-20 21:51:48
你不接柱子看看情况如何,确认是色谱柱的问题再去冲洗吧。如果确认是色谱柱的问题的话可以用IPA来冲洗过夜看看。
6楼2012-07-20 19:40:43
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文少520

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-07-20 21:51:54
LZ的色谱柱是不是问题
我是小虫,我要升级
7楼2012-07-20 21:29:18
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

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karl2100: 金币+1, 谢谢! 2012-07-21 09:50:47
会不会是样品中有水溶性物质吸附了?如果是的话不妨用10%甲醇-水冲冲看,你总用有机相冲洗也不能把水溶性物质冲出来啊……另外,6楼说的也很有道理啊,如果是管路污染了或者检测池污染了你这样冲效率很低啊。
8楼2012-07-21 09:29:39
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TSRCD

木虫 (正式写手)

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karl2100: 金币+1, 3Q 2012-07-22 00:27:56
最好是90%水冲一个钟,然后70甲醇,10甲醇,纯甲醇冲,这样好点,毕竟你里面的东西不明确,系统的冲下较好
努力
9楼2012-07-21 10:24:44
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zhongqq

铜虫 (小有名气)

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karl2100: 金币+1, 谢谢! 2012-07-22 00:28:08
你的柱子用过含盐的流动相之后是不能直接用纯甲醇冲的,你现在这样,柱子里面可能已经有盐分析晶了,用5-10%的甲醇/水小流速持续冲个一天看看,能不能缓解。
10楼2012-07-21 10:33:12
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