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zhangzhijuan

银虫 (小有名气)

[求助] 请问“色谱柱冲洗至饱和”中“饱和”是什么意思?要冲多长时间呢一般? 已有5人参与

请问“色谱柱冲洗至饱和”中“饱和”是什么意思?要冲多长时间呢一般?
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zzl198338

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般5到10个柱体积就可以了。
饱和的意思就是流出跟流入的各种参数都一致了。具体表现为,基线平了。
2楼2013-12-16 09:16:20
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该指的是冲洗至平衡吧,一般的话,冲洗0.5~1.0h就基本上都能平衡了。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
3楼2013-12-16 09:30:00
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yangxiaotian

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
河边的芦苇: 金币+1, 感谢您的耐心讲解 2013-12-16 22:37:49
所谓 饱和 ,就是平常大家说的,把色谱基线冲平啊,把色谱柱平衡好啊。饱和是色谱柱生产厂家的官方语言。将色谱柱 饱和 的操作方法,就是使用你需要的流动相,冲洗色谱柱。流动相的冲洗量,应至少大于色谱柱柱体积的10-20倍,对于新色谱柱,最好冲洗20倍。
如何计算冲洗20倍呢?首选需要知道色谱柱的参数,即 柱长、柱内径,将色谱柱看作是圆柱体,按照圆柱体的体积计算公式(这个公式,我就不写了吧,初中数学就学过了,底面积乘以高)计算你所用色谱柱的大概体积,然后,可以计算需要冲洗的流动相体积。
一般,4.6*250mm的色谱柱,柱体积是4ml,冲洗20倍,就是需要冲洗80ml的流动相,如果流速1.0mimin,就需要冲洗80分钟。基本上,色谱柱就平衡了,基线就平稳了。就可以开展样品检测了。
我为人人,人人为我。
4楼2013-12-16 11:56:17
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yangxiaotian

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

更正一个错误的概念,一般进行色谱检测的人,都喜欢说,冲洗多少时间,实际上这个是不准确的,如上帖所说,如果流速1.0ml/min,则需要冲洗80分;如果,流速0.5ml/min,则需要冲洗160分。所以,严格说,应是冲洗多少体积的流动相,而不是冲洗多长时间。
我为人人,人人为我。
5楼2013-12-16 11:59:01
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yi_wang

铁杆木虫 (著名写手)

roye

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
平衡即饱和
方法是:用水-有机相(90:10~95:5),以0.6ml/min
流速冲洗1h以上→再用100%有机溶剂,以1ml/min流速冲洗30min以上→然后调整水-有机相的比例接近流动相水相-有机相的比例,以1ml/min流速冲洗30min左右→最后用流动相平衡1h以上,进样检测。
哥泡的不是论坛,是寂寞....
6楼2013-12-16 14:18:53
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顾莫柔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
冲至饱和指的是压力、基线成平行线(不再漂移、波动),平行后约30min就可流速调零、取柱子了。
矫情的不是我是生活,残忍的不是我是很多。
7楼2013-12-16 20:46:32
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