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zhangzhijuan

银虫 (小有名气)

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[求助] 请问“色谱柱冲洗至饱和”中“饱和”是什么意思？要冲多长时间呢一般？已有5人参与

请问“色谱柱冲洗至饱和”中“饱和”是什么意思？要冲多长时间呢一般？

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1楼 2013-12-14 23:29:02

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yangxiaotian

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
河边的芦苇: 金币+1, 感谢您的耐心讲解 2013-12-16 22:37:49

所谓饱和，就是平常大家说的，把色谱基线冲平啊，把色谱柱平衡好啊。饱和是色谱柱生产厂家的官方语言。将色谱柱饱和的操作方法，就是使用你需要的流动相，冲洗色谱柱。流动相的冲洗量，应至少大于色谱柱柱体积的10-20倍，对于新色谱柱，最好冲洗20倍。
如何计算冲洗20倍呢？首选需要知道色谱柱的参数，即柱长、柱内径，将色谱柱看作是圆柱体，按照圆柱体的体积计算公式（这个公式，我就不写了吧，初中数学就学过了，底面积乘以高）计算你所用色谱柱的大概体积，然后，可以计算需要冲洗的流动相体积。
一般，4.6*250mm的色谱柱，柱体积是4ml，冲洗20倍，就是需要冲洗80ml的流动相，如果流速1.0mimin，就需要冲洗80分钟。基本上，色谱柱就平衡了，基线就平稳了。就可以开展样品检测了。