应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 毕赤表达，有些有酶活无蛋白，有些有蛋白没有酶活
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 1363  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jialemon

新虫 (初入文坛)

[交流] 毕赤表达，有些有酶活无蛋白，有些有蛋白没有酶活 已有5人参与

最近用ppic9K和GS115做酶基因表达，挑取几个菌落做甲醇诱导表达，48h取样测酶活并跑SDS-PAGE，结果非常奇怪，有些没有酶活但又条带，但有些没有酶活却有目的蛋白条带，不过也有正常的（有酶活有条带）。有懂得能否指导一下，很纠结。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-14 12:25:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hzlatqh

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-07-16 13:39:49
有酶活没蛋白：
1可能是有些蛋白表达量不高吧，所以SDSPAGE看不出来，但活性是有的。
2或者目标蛋白没有以预期大小表达出来，但酶活还是存在。可以做个western试试。

有蛋白没酶活：
1说明这个蛋白容易失活，至少在你的试验条件下容易失活。
2可能蛋白活性需要某些辅酶，而异源表达情况下没有。。。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

jialemon
两个黄鹂鸣翠柳，一行白鹭上青天
4楼2012-07-15 13:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

jialemon

新虫 (初入文坛)
肿么没有人回复呀，求救呀
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-14 20:17:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统（国产）销售
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
帮忙顶了。顺便 请问你有km71h吗？
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-15 11:30:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

84146922

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-16 13:40:02
1.有酶活没有带，可能蛋白量少，建议浓缩后再进行电泳，或者顺便做下western.

2.有带没有酶活，有目的蛋白带而无酶活的发酵液，使用镜检，酵母形态正常吗？
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-16 08:31:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱倩
6楼2012-07-17 10:00:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiandizao

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-07-15 13:20:28
有酶活没蛋白：
1可能是有些蛋白表达量不高吧，所以SDSPAGE看不出来，但活性是有的。
2或者目标蛋白没有以预期大小表达出来，但酶活还是存在。可以做个western试试。

有蛋白没酶活：
1说明这个蛋白容易失活， ...

有条带但没有酶活这个，要确定是目的条带吗，还有你做的这给酶活是怎么确定的，实验条件都一样，做酶活实验时有没有先定量，蛋白量过高会不会有抑制作用
赞一下 回复此楼
不断的修正问题，改正错误中走向永恒
7楼2012-07-17 10:48:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jialemon

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by tiandizao at 2012-07-17 10:48:04
有条带但没有酶活这个，要确定是目的条带吗，还有你做的这给酶活是怎么确定的，实验条件都一样，做酶活实验时有没有先定量，蛋白量过高会不会有抑制作用...

现在问题基本解决了，可能是因为我测酶活时的酶液没有完全酶活，以至于测不到酶活，谢谢！
赞一下 回复此楼
8楼2012-07-27 19:43:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jialemon

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 84146922 at 2012-07-16 08:31:48
1.有酶活没有带，可能蛋白量少，建议浓缩后再进行电泳，或者顺便做下western.

2.有带没有酶活，有目的蛋白带而无酶活的发酵液，使用镜检，酵母形态正常吗？

问题已解决，谢谢！
回复此楼
9楼2012-07-27 19:44:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jialemon

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-07-15 13:20:28
有酶活没蛋白：
1可能是有些蛋白表达量不高吧，所以SDSPAGE看不出来，但活性是有的。
2或者目标蛋白没有以预期大小表达出来，但酶活还是存在。可以做个western试试。

有蛋白没酶活：
1说明这个蛋白容易失活， ...

问题解决了 非常感谢
赞一下 回复此楼
10楼2012-07-27 19:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jialemon 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 370求调剂 +3 080700调剂 2026-03-30 3/150 2026-03-31 01:09 by A_Zhe
[考研] 求调剂 +3 图鉴212 2026-03-30 3/150 2026-03-31 00:31 by jp9609
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 材料工程专硕求调剂 +8 hyl3153942 2026-03-29 8/400 2026-03-30 20:45 by dophin1985
[考研] 286分调剂 +10 Faune 2026-03-30 11/550 2026-03-30 20:35 by 啊李999
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +7 萝卜炖青菜 2026-03-28 8/400 2026-03-30 19:59 by 无际的草原
[考研] 289求调剂 +16 新时代材料 2026-03-27 16/800 2026-03-30 19:04 by Wang200018
[考研] 310求调剂 +10 争取九点睡 2026-03-30 10/500 2026-03-30 16:45 by ztnimte
[考研] 262求调剂 +4 ZZ..000 2026-03-30 4/200 2026-03-30 15:57 by wangjy2002
[考研] 085602 化学工程专硕 340分求调剂 +4 qianbai11 2026-03-29 4/200 2026-03-30 11:34 by 唐沐儿
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +5 笃行致远. 2026-03-28 5/250 2026-03-30 06:56 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 总分293求调剂 +8 加一一九 2026-03-25 11/550 2026-03-29 19:53 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +7 哇呼哼呼哼 2026-03-27 9/450 2026-03-28 12:22 by zllcz
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭