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木虫 (小有名气)

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专业: 临床免疫学检验

[求助] 真菌18s、its PCR失败原因

做了好几次了，换tap酶，换程序都P不出来，求高手能不能从这图中看出哪的问题指点一下，谢谢
图中从左边是四个its，右边是四个18s，中间是500bpmarker

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1楼2012-07-08 09:12:18

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木虫 (小有名气)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by zhenlisha at 2012-07-10 08:53:20
图看不出来哪里出现问题，zl把体系和程序写出了，大家才能帮你

体系：ddH2O 29.8μL; 10*PCRbuffer 5μL；（2.5μM）dNTP 8.0μL;(10μM)上下引物各1μL；taq（5μ/μL）0.5μL;模板 2μL
程序：94℃ 2min,30cycles(98℃,10s;50℃,30s;72℃,50s for ITS / 1min 50s for 18S),72℃ 10min,4℃ stored
注：引物都为通用引物
麻烦了