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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 真菌18s、its PCR失败原因
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690733791

木虫 (小有名气)

[求助] 真菌18s、its PCR失败原因

做了好几次了，换tap酶，换程序都P不出来，求高手能不能从这图中看出哪的问题指点一下，谢谢
图中从左边是四个its，右边是四个18s，中间是500bpmarker
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1楼 2012-07-08 09:12:18
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690733791

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhenlisha at 2012-07-10 08:53:20
图看不出来哪里出现问题，zl把体系和程序写出了，大家才能帮你

体系：ddH2O 29.8μL; 10*PCRbuffer 5μL；（2.5μM）dNTP 8.0μL;(10μM)上下引物各1μL；taq（5μ/μL）0.5μL;模板 2μL
程序：94℃ 2min,30cycles(98℃,10s;50℃,30s;72℃,50s for ITS / 1min 50s for 18S),72℃ 10min,4℃ stored
注：引物都为通用引物
麻烦了
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10楼2012-07-10 10:56:40
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lmqml24

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2012-07-08 09:36:36
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690733791

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lmqml24 at 2012-07-08 09:36:36
泳道杂质太多，是否与所提DNA有关，你可以跑个DNA的电泳图看看。

DNA之前跑了，虽然有些弥散，但是主要的那条带还是很亮的
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-08 10:11:47
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vanstefanie

铁虫 (小有名气)
不懂，但我也要做，先看看
赞一下 回复此楼
Iknowucan'tliveonhopealone,butwithouthopelifeisnotworthliving.
4楼2012-07-08 10:56:47
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