应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双缩脲法测蛋白含量标准曲线绘制中出现的问题
281/1返回列表
查看: 7150  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 双缩脲法测蛋白含量标准曲线绘制中出现的问题

以双缩脲法测定蛋白含量，在绘制标准曲线时，1ml标液与4ml双缩脲试剂反应显色30min后测定吸光度值，为何吸光度值总在0.2以下？ 且反应液不呈紫红色而是由蓝色的由淡黄色的？请各位大侠指示，谢谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质贴

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-07-05 17:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yuli121121

铜虫 (初入文坛)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
在做实验过程中，本人也遇到这样的问题，跪求楼主指点最后是怎么解决的。。。不胜感激
赞一下(1人) 回复此楼
24楼2014-10-17 09:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
楼主真好！
回复此楼
4楼2012-07-05 18:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
???~~~~~~~~~~~~~~~~~
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-05 18:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

捡金小儿

新虫 (著名写手)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
添人气的！
回复此楼
11楼2012-07-05 18:34:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
是不是试剂存在问题呀，还有蛋白会不会变性了
赞一下 回复此楼
12楼2012-07-05 18:38:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-05 18:38:35
是不是试剂存在问题呀，还有蛋白会不会变性了

蛋白肯定是没有变性的，而双缩尿试剂是按照标准配制的，1.5克硫酸铜和6.0克酒石酸钾钠溶于500ml蒸馏水，在搅拌下加入300ml 10%氢氧化钠，用水定容至1000ml。现在就是不知道问题出在哪里了。。。
赞一下 回复此楼
13楼2012-07-05 20:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
那楼主可以换个方法测定的，我们实验室一般采用的考马斯亮蓝法测定的
赞一下 回复此楼
14楼2012-07-06 08:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biomater

银虫 (著名写手)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
0.2以上还是很容易的啊，我测试0.3以上的数据都有啊！颜色是很蓝很蓝，有点紫色的样子，不显黄色！
我用的是总蛋白测定试剂试剂盒。
显色反应在37℃水浴10min。
赞一下 回复此楼
15楼2012-07-06 10:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-06 08:44:28
那楼主可以换个方法测定的，我们实验室一般采用的考马斯亮蓝法测定的

其实，蛋白含量测定方法很多，我是以双缩脲法测定谷胱甘肽含量的，反正都是基于2个肽键的反应嘛，但是结果很不好。
赞一下 回复此楼
16楼2012-07-06 15:57:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by biomater at 2012-07-06 10:15:50
0.2以上还是很容易的啊，我测试0.3以上的数据都有啊！颜色是很蓝很蓝，有点紫色的样子，不显黄色！
我用的是总蛋白测定试剂试剂盒。
显色反应在37℃水浴10min。

双缩脲法测定蛋白的含量范围是1--10mg嘛，但是我以8mg、10mg谷胱甘肽标样测定时，吸光度值也不超过0.2的，就是不知道原因。

PS：我是以双缩脲法测定蛋白含量的原理来测定谷胱甘肽含量的
赞一下 回复此楼
17楼2012-07-06 16:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biomater

银虫 (著名写手)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
波长多少？540nm？不会啊。。。这个量应该会出现0.3以上的

[ Last edited by biomater on 2012-7-6 at 18:04 ]
赞一下 回复此楼
18楼2012-07-06 18:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by biomater at 2012-07-06 18:01:16
波长多少？540nm？不会啊。。。这个量应该会出现0.3以上的

嗯，540nm
回复此楼
19楼2012-07-07 12:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张枫12345678

新虫 (小有名气)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
有没有正确的标准曲线啊？急求
赞一下 回复此楼
21楼2013-05-23 10:32:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jullo

新虫 (初入文坛)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
我的也有這個問題
赞一下 回复此楼
22楼2013-12-16 15:19:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jullo

新虫 (初入文坛)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
我也是遇到這個問題，只不過我之前配製時還有吸光值
怎麼重配試劑後，怎麼反應都到達不到
試劑都有開新的藥了
赞一下 回复此楼
23楼2013-12-17 00:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xipha

木虫 (正式写手)
★
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
这个氢氧化钠溶液要新配. 楼主的氢氧化钠是不是旧的.
赞一下 回复此楼
25楼2014-10-18 00:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a877745785

新虫 (初入文坛)
2333333

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
26楼2014-10-18 00:21:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silvial0308

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
想问一下楼主，药典中的双缩脲配制方法跟你这个不一样，双缩脲的配制会不会有影响？而且你的标准溶液是用什么稀释的，是水还是0.05mol/l氢氧化钠？
赞一下 回复此楼
27楼2015-01-19 14:57:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silvial0308

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主，我也查阅了一些资料，双缩脲试剂的配制一般都是用你的这个方法，但是药典上的方法跟你的不太一样，会不会有影响？而且你的标准溶液时用什么稀释的，是水还是0.05mol/l的氢氧化钠溶液
赞一下 回复此楼
28楼2015-01-19 15:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
cilinxue2楼
2012-07-05 17:33   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
cilinxue3楼
2012-07-05 17:33   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
userhung6楼
2012-07-05 18:17   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
啄虫鸟7楼
2012-07-05 18:28   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
yaoyao1458楼
2012-07-05 18:28   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
yaoyao1459楼
2012-07-05 18:28   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
liang888710楼
2012-07-05 18:30   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
yingying158820楼
2012-07-07 17:44   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 gaohuihui 的主题更新
281/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 26自然地理学303分求调剂 +6 一战成硕啊啊啊� 2026-04-06 11/550 2026-04-11 21:27 by 裴宏伟
[考研] 一志愿211，0703化学305分求调剂 +25 严西西戏 2026-04-06 32/1600 2026-04-11 21:20 by zhouxiaoyu
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +18 ioodiiij 2026-04-08 18/900 2026-04-11 20:25 by liyun12321
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 302分求调剂 +9 凡语祈愿 2026-04-08 10/500 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 一志愿京区985，085401电子信息，本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 生物与医药调剂 +5 十七sa 2026-04-05 5/250 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-04 4/200 2026-04-08 08:41 by barlinike
[考研] 085602调剂 初试总分335 +3 19123253302 2026-04-06 3/150 2026-04-07 18:00 by jp9609
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 生物工程求调剂 +13 喜欢还是不甘心 2026-04-05 13/650 2026-04-07 16:55 by Ecowxq666！
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭