24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 7164  |  回复: 27

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)


[交流] 双缩脲法测蛋白含量标准曲线绘制中出现的问题

以双缩脲法测定蛋白含量,在绘制标准曲线时,1ml标液与4ml双缩脲试剂反应显色30min后测定吸光度值,为何吸光度值总在0.2以下? 且反应液不呈紫红色而是由蓝色的由淡黄色的?请各位大侠指示,谢谢!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质贴

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yuli121121

铜虫 (初入文坛)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
在做实验过程中,本人也遇到这样的问题,跪求楼主指点最后是怎么解决的。。。不胜感激
24楼2014-10-17 09:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
楼主真好!
4楼2012-07-05 18:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
???~~~~~~~~~~~~~~~~~
5楼2012-07-05 18:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

捡金小儿

新虫 (著名写手)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
添人气的!
11楼2012-07-05 18:34:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
是不是试剂存在问题呀,还有蛋白会不会变性了
12楼2012-07-05 18:38:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
12楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-05 18:38:35
是不是试剂存在问题呀,还有蛋白会不会变性了

蛋白肯定是没有变性的,而双缩尿试剂是按照标准配制的,1.5克硫酸铜和6.0克酒石酸钾钠溶于500ml蒸馏水,在搅拌下加入300ml 10%氢氧化钠,用水定容至1000ml。现在就是不知道问题出在哪里了。。。
13楼2012-07-05 20:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
那楼主可以换个方法测定的,我们实验室一般采用的考马斯亮蓝法测定的
14楼2012-07-06 08:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biomater

银虫 (著名写手)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
0.2以上还是很容易的啊,我测试0.3以上的数据都有啊!颜色是很蓝很蓝,有点紫色的样子,不显黄色!
我用的是总蛋白测定试剂试剂盒。
显色反应在37℃水浴10min。
15楼2012-07-06 10:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
14楼: Originally posted by wqj1988926 at 2012-07-06 08:44:28
那楼主可以换个方法测定的,我们实验室一般采用的考马斯亮蓝法测定的

其实,蛋白含量测定方法很多,我是以双缩脲法测定谷胱甘肽含量的,反正都是基于2个肽键的反应嘛,但是结果很不好。
16楼2012-07-06 15:57:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
15楼: Originally posted by biomater at 2012-07-06 10:15:50
0.2以上还是很容易的啊,我测试0.3以上的数据都有啊!颜色是很蓝很蓝,有点紫色的样子,不显黄色!
我用的是总蛋白测定试剂试剂盒。
显色反应在37℃水浴10min。

双缩脲法测定蛋白的含量范围是1--10mg嘛,但是我以8mg、10mg谷胱甘肽标样测定时,吸光度值也不超过0.2的,就是不知道原因。

PS:我是以双缩脲法测定蛋白含量的原理来测定谷胱甘肽含量的
17楼2012-07-06 16:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biomater

银虫 (著名写手)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
波长多少?540nm?不会啊。。。这个量应该会出现0.3以上的

[ Last edited by biomater on 2012-7-6 at 18:04 ]
18楼2012-07-06 18:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
18楼: Originally posted by biomater at 2012-07-06 18:01:16
波长多少?540nm?不会啊。。。这个量应该会出现0.3以上的

嗯,540nm
19楼2012-07-07 12:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张枫12345678

新虫 (小有名气)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
有没有正确的标准曲线啊?急求
21楼2013-05-23 10:32:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jullo

新虫 (初入文坛)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
我的也有這個問題
22楼2013-12-16 15:19:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jullo

新虫 (初入文坛)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
我也是遇到這個問題,只不過我之前配製時還有吸光值
怎麼重配試劑後,怎麼反應都到達不到
試劑都有開新的藥了
23楼2013-12-17 00:55:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xipha

木虫 (正式写手)



gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
这个氢氧化钠溶液要新配. 楼主的氢氧化钠是不是旧的.
25楼2014-10-18 00:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a877745785

新虫 (初入文坛)


2333333

[ 发自小木虫客户端 ]
26楼2014-10-18 00:21:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silvial0308

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想问一下楼主,药典中的双缩脲配制方法跟你这个不一样,双缩脲的配制会不会有影响?而且你的标准溶液是用什么稀释的,是水还是0.05mol/l氢氧化钠?
27楼2015-01-19 14:57:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silvial0308

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主,我也查阅了一些资料,双缩脲试剂的配制一般都是用你的这个方法,但是药典上的方法跟你的不太一样,会不会有影响?而且你的标准溶液时用什么稀释的,是水还是0.05mol/l的氢氧化钠溶液
28楼2015-01-19 15:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
cilinxue2楼
2012-07-05 17:33   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
cilinxue3楼
2012-07-05 17:33   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
userhung6楼
2012-07-05 18:17   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
啄虫鸟7楼
2012-07-05 18:28   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
yaoyao1458楼
2012-07-05 18:28   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
yaoyao1459楼
2012-07-05 18:28   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
liang888710楼
2012-07-05 18:30   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
2012-07-07 17:44   回复  
gaohuihui(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 gaohuihui 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿材料科学与工程985,365分, +7 材化李可 2026-04-11 9/450 2026-04-12 01:09 by 秋豆菜芽
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-11 7/350 2026-04-11 23:48 by baobaoye
[考研] 266求调剂,一志愿哈工程电子信息,本科获多项国奖和省奖 +8 lumine1 2026-04-06 8/400 2026-04-11 18:35 by 逆水乘风
[考研] 农学0904 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-11 3/150 2026-04-11 17:22 by daydayup2005
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 307求调剂 +8 tzq94092 2026-04-10 8/400 2026-04-10 17:33 by 286640313
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 08工学 309分求调剂 +6 Yin DY 2026-04-08 6/300 2026-04-10 09:18 by Delta2012
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +11 Nadiums 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:04 by lijunpoly
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 考研调剂 +13 冰冰,,, 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 349学科化学045106求调剂,化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 327考研调剂推荐 +6 呜呜呜呜呢 2026-04-06 6/300 2026-04-06 21:39 by 啵啵啵0119
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
信息提示
请填处理意见