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jl860822

金虫 (正式写手)

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专业: 生物化学

[求助] Western Blot出现问题已有1人参与

最近Western blot做不出结果，希望大家多多指教
目的蛋白大小20kD左右，跑SDS可以看到，转膜后也可以看到，但是ECL显色后没有条带，只有白的亮的一片，而且也不清楚这些亮的一片到底是化学发光还是其他什么东西，各位高手有没有遇到这种情况，希望能给些好的建议

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1楼2012-07-04 21:39:41

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tiger234

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专业: 临床医学

【答案】应助回帖

如果像你说的信号过强，那你用的二抗浓度多大，洗了多久？包括一抗浓度选用合适吗？

9楼2012-07-10 00:53:21

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tiger234

银虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

没用过这个牌子的二抗。1:3000肯定算高的了，而且你洗的时间太短。如果我摸索条件，肯定起始二抗浓度1:10000，洗至少3次，每次10分钟，然后慢慢曝光。

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12楼2012-07-11 23:41:34

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