| 查看: 1780 | 回复: 3 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
Ni-NTA纯化蛋白
|
||||
| 用Ni柱纯化带His-tag的蛋白，看说明书上说如果是纯化相同的蛋白用0.5M的NaOH洗30min就行。我想知道如果是纯化不同的蛋白呢，那我要把树脂都扔了换新的吗？还是需要怎么处理一下才能纯化另一种新的蛋白呢 请知道的大神指导一下吧 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细胞生物学实验经验 | 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有181人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 亲和层析柱重生问题
已经有8人回复
- 重组蛋白含半胱氨酸纯化过程如何保护巯基
已经有14人回复
- 蛋白纯化
已经有7人回复
- 关于Ni-NTA纯化蛋白
已经有19人回复
- 蛋白质很纯，但不长晶体
已经有10人回复
- 关于用Ni-NTA His.bind树脂纯化原核表达蛋白
已经有16人回复
- gst标签蛋白的表达和纯化
已经有17人回复
- 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化
已经有10人回复
- 重组蛋白结合不到ni柱上
已经有24人回复
- 【求助/交流】有谁知道纤维素酶的浓缩纯化都有哪些方法？
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于Ni-NTA
已经有12人回复
- 【求助/交流】蛋白不挂柱怎么办
已经有11人回复
dshlove
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 17
- 应助: 237 (大学生)
- 金币: 4764.7
- 散金: 20
- 红花: 10
- 帖子: 852
- 在线: 419.2小时
- 虫号: 1609389
- 注册: 2012-02-10
- 性别: GG
- 专业: 污染控制化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: MolEPI+1, 支持 2012-06-29 13:05:50
da_da: 金币+3 2012-06-29 18:52:50
da_da: 金币+4 2012-08-30 10:13:29
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: MolEPI+1, 支持 2012-06-29 13:05:50
da_da: 金币+3 2012-06-29 18:52:50
da_da: 金币+4 2012-08-30 10:13:29
|
我觉得，首先你要先弄清楚你的目的，你是要清洗柱子还是要再生柱子。 我给你点建议啊： 1.平常清洗（每次使用后，就算下次用在不同蛋白纯化上也适用。） 先用500mM咪唑冲洗3-5个柱体积，然后立即用纯水平衡5个柱体积。 2.每月清洗（一个月或者使用15次左右，柱子载量有所下降时，记住是载量下降了，所以，你说的方法不是常规的清晰方法。） 0.2M NaOH 冲洗2个柱体积，室温放置一夜或37℃放置2h。再用纯水平衡至少5个柱体积。 3.挂镍再生（柱子堵塞，压力升高，载量显著下降时），这个就比较麻烦了，需要的话再给你。 |
4楼2012-06-29 10:07:18
路基亚的暴诞
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 贵宾: 0.1
- 金币: 1124.8
- 散金: 25
- 红花: 10
- 帖子: 352
- 在线: 71.8小时
- 虫号: 1036492
- 注册: 2010-06-06
- 性别: GG
- 专业: 药物化学
2楼2012-06-28 22:32:15
3楼2012-06-28 23:40:00
