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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 构建了个基因的表达载体，发现有一个氨基酸发生突变
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sanshi405

金虫 (小有名气)

[求助] 构建了个基因的表达载体，发现有一个氨基酸发生突变 已有1人参与

构建了个基因的表达载体，发现有一个氨基酸发生突变，怎样才能知道这个氨基酸起没起作用啊？一定要重新构建吗？求指点！
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1楼 2012-06-28 15:15:30
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

504775490

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有突变可能是测序的问题，可以要求公司再重测一次，真是突变的话可以设计引物突变回来，氨基酸突变可能会蛋白质有所影响，蛋白质这个东西还是比较复杂的，实在不行就重新构吧！个人意见，仅供参考！
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8楼2012-06-30 13:11:43
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普通回帖

547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-28 16:01:21
BLASTP找各种相似序列，比较该位置是否有出新突变后的氨基酸的序列；分析该位置氨基酸对酶结构和催化起什么作用；分析突变前后氨基酸的性质差异，最后预测突变后对酶结构和催化有什么影响。
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为什么
2楼2012-06-28 15:20:33
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sk_yb

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不能完全确定，只能预测。还是重新构建比较省事
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3楼2012-06-28 15:30:17
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冰泉cathy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-28 16:01:33
发生突变不一定是坏事，我觉得可以继续往下做，但同时也要重新构建序列完全正确的载体，然后和突变的进行对比，说不定会有好的结果呢。
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4楼2012-06-28 15:44:18
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十二1130

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果突变后氨基酸没有改变的话，可以继续实验，但是突变位点改变了氨基酸类型，那就要重新构建了。
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5楼2012-06-28 23:18:26
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lyweichen

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有突变也可能是测序的问题，重复测序验证，还有可能是你模板有问题哦。比较突变后的氨基酸与突变前的性质，如果相同，也没有必要吧。当然最好的是重新构建。
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6楼2012-06-28 23:44:20
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easonyshen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新测序以确定突变。 然后再使用定点突变手段将位点变回来。
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蛋白质工程师：荧光蛋白开发
7楼2012-06-30 06:33:35
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
强烈建议重新构建！
既然你都已经构建好了，重新构建也很快。大不了做定点突变回去好了。
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9楼2012-07-01 11:35:48
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
找出原因，重新构建吧，这样应该比较保险。
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10楼2012-07-01 13:47:48
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