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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 有没有人做过胆红素的液相，我的峰分叉了
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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王丽84

银虫 (正式写手)

[求助] 有没有人做过胆红素的液相，我的峰分叉了 已有1人参与

以为是柱子的原因，但是换了一根同样分叉了，对照品用氯仿溶解，都没有超声直接振摇溶解的。

看文献报道是不稳定，但是也只是峰面积减小，不会分叉啊
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1楼 2012-06-14 12:18:42
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+3, 感谢，辛苦啦 2012-06-17 13:55:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王丽84 at 2012-06-14 14:31:53
我看有的文章也是用氯仿溶解的，易于溶于氯仿，我溶解完直接进样还是峰的前后有小包...

1、色谱柱未必适合
2、溶剂效应
3、样品如溶剂及流动相相容性低
4、样品过载
建议逐一排除
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守候在风中的宁静。
4楼2012-06-14 14:56:24
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普通回帖

houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氯仿溶解样品不合适，可能会有溶剂效应
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2楼2012-06-14 12:59:12
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王丽84

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by houqian387 at 2012-06-14 12:59:12
氯仿溶解样品不合适，可能会有溶剂效应

我看有的文章也是用氯仿溶解的，易于溶于氯仿，我溶解完直接进样还是峰的前后有小包
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3楼2012-06-14 14:31:53
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

同意楼上观点！
我没什么补充的了
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5楼2012-06-14 15:05:37
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weijie302

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+3, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-06-17 13:55:13
soundhorizo: ACI+1 2012-06-17 13:55:32
我觉得可能性比较大原因是胆红素在流动相中的溶解性不好造成的，建议在能检测到的基础上稀释样品。另外，若是必须用氯仿溶解，进样体积不要太大，最好控制在1~2微升左右，进样体积太大的话氯仿与流动相兼容性不好。
我以前就碰到过因为溶解度问题峰分叉的现象，减小进样量就可以解决了。
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6楼2012-06-14 21:32:55
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王丽84

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by weijie302 at 2012-06-14 21:32:55
我觉得可能性比较大原因是胆红素在流动相中的溶解性不好造成的，建议在能检测到的基础上稀释样品。另外，若是必须用氯仿溶解，进样体积不要太大，最好控制在1~2微升左右，进样体积太大的话氯仿与流动相兼容性不好。 ...

因为449nm检测信号已经很弱了，溶解性很好的，都没有超声振摇溶解的了
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7楼2012-06-15 11:52:46
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weijie302

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 王丽84 at 2012-06-15 11:52:46
因为449nm检测信号已经很弱了，溶解性很好的，都没有超声振摇溶解的了...

我说的不是氯仿溶解性不好，而是说样品进入色谱柱后在流动相体系中溶解性不好。试想你的样品很好的溶于氯仿后，进样，然后大量的流动相带着样品进入色谱柱，如果流动相溶解性不好的话，就会在色谱柱柱头析出，析出后的样品又被后续的流动相溶解，这样整个样品就会在色谱柱上分段，结果出现两个峰是很正常的事情。
若可以的话，用起始条件的流动相溶解样品，这样是最保险的。但是我查到胆红素的水溶性和醇溶性都不好，所以在能检到的基础上尽量减小进样量，看看能否解决分叉的问题吧。
对了，说了这么多，你做的是反向色谱吧？
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8楼2012-06-15 14:50:38
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王丽84

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by weijie302 at 2012-06-15 14:50:38
我说的不是氯仿溶解性不好，而是说样品进入色谱柱后在流动相体系中溶解性不好。试想你的样品很好的溶于氯仿后，进样，然后大量的流动相带着样品进入色谱柱，如果流动相溶解性不好的话，就会在色谱柱柱头析出，析出 ...

恩，反相的，流动相是甲醇：氯仿：1%磷酸( 81 : 13 : 6)，我改了下甲醇：氯仿：1%磷酸( 80 : 12 : 8)。前后两个小峰就和主峰基线分离了
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9楼2012-06-17 13:37:13
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fly1986714

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
soundhorizo: 金币+1, 应助指数+1, 感谢应助 欢迎常来分析版交流指导^^ 2012-07-02 11:07:32
用流动相稀释标样试下，进样量小点
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10楼2012-07-02 09:24:54
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