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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】做液相时为什么会出现倒峰？
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laner1983

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】做液相时为什么会出现倒峰？ 已有13人参与

请教大家为什么做HPLC时出来的普图里面会有倒峰呢？
为了测量普图的重现性，我每个样品进两针，这两针的保留时间和峰面积都会有些差别，请问下他们的差别大概有多大时表明数据重现性良好。
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1楼 2010-02-22 16:49:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

灰狐狸

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-03-26 22:45
楼主的问题涉及到液相分析方法的验证中的进样精密度要求，一般同一份溶液连续进样5针，计算峰面积和保留时间的RSD%,小于2％即符合规定。
倒峰分两种情况，如果每针都有，是由于配制样品的溶液与流动相组成对紫外光吸收差异过大造成的，用流动相溶解样品或稀释可以解决；如果这针有下针没有，就是进气泡了，好好冲一下管路和色谱柱吧
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15楼2010-03-11 20:24:38
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小黑315

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1.多为溶剂峰造成的(建议处理样品用流动相溶解)
2.检测波长引起（流动相的紫外吸收大于样品的溶剂的紫外吸收）
3.流动相或检测池有气泡。
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29楼2010-05-06 15:16:36
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普通回帖

westzilch

铁杆木虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-02-22 18:00
如果是视差检测器是有倒峰的，如果是紫外检测器，说明吸收波长低于你设置的检测波长了
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2楼2010-02-22 16:56:15
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kkbyb

木虫 (著名写手)
★
amisking(金币+1): 2010-02-22 19:28
简单样品,附近没有干扰,保留时间1分钟内(前后各0.5),面积当作回收率算一下,98-102
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3楼2010-02-22 19:27:18
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shengchanbu2008

出现倒峰一般是机子没走平或系统有问题!!!
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4楼2010-02-23 09:54:10
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hfchenxu

木虫 (正式写手)
基线是否设置为零，并且是否平稳。
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5楼2010-02-23 10:14:41
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tpmwq

金虫 (小有名气)
出现倒峰会不会是水峰啊？
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6楼2010-02-23 12:08:30
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三枝九叶草

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
吸收值低于流动相，可能为气泡
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7楼2010-03-04 13:00:09
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taiyangl

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有一些特殊流动相就会产生倒峰比如四氢呋喃等。
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8楼2010-03-04 18:15:46
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hujing5220

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用流动相配样，就不会有倒峰
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冬日暖阳
9楼2010-03-06 13:43:54
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hujing5220

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by kkbyb at 2010-02-22 19:27:18:
简单样品,附近没有干扰,保留时间1分钟内(前后各0.5),面积当作回收率算一下,98-102

如果主峰7min出，保留时间差1分钟内(前后各0.5），差的是不是有点多啊
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冬日暖阳
10楼2010-03-06 13:46:32
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