| 查看: 1434 | 回复: 2 | ||
[求助]
xgal蓝白斑实验遇到问题
|
|
我想验证一段序列是否具有启动子活性，于是改造了pET28a，在多克隆位点处加上一段lacZα做报告基因，测序正确，在用Xgal做篮斑实验是出现以下问题 1、将Xgal直接添加到LB固体培养基到平板，+IPTG不变蓝 2、将Xgal涂在平板表面，+IPTG不变蓝 3、将X-α-Gal倒平板，阴性对照（我把T7启动子切掉作为阴性对照菌）也变蓝 我的Xgal是没问题的，用pCambia1301做阳性对照划线是变蓝的。而我的lacZ片段就是从1301里面PCR出来的，经过密码子优化去除了5‘端MCS。 另外我的Xgal是用DMSO配置的，这个应该没影响吧？ 好无助啊，整了好久，先谢谢大家 |
回复此楼» 猜你喜欢
听说今天filecode变了
已经有34人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
基金中了
已经有6人回复
-
filecode
已经有14人回复
-
固定端突然变了，今天
已经有7人回复
-
filecode
已经有11人回复
-
大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑
已经有6人回复
-
一个有机合成实验室都需要哪些设备？
已经有12人回复
-
求各位大神看下
已经有33人回复
-
咨询面上基金
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蓝白斑筛选只长白斑
已经有10人回复
- 蓝白斑筛选时IPTG，Xgal，Amp的用量
已经有14人回复
- 蓝斑和白斑都有带，为什么呢 急。
已经有9人回复
- 蓝白斑筛选的问题
已经有5人回复
- 求助：蓝白斑筛选的白色菌再次转化成蓝色？？？？？
已经有4人回复
- 蓝白斑筛选问题
已经有6人回复
- X—Gal IPTG蓝白斑试验
已经有8人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】pMD-18T载体连接出现了问题，请各位高手指点！！！
已经有17人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选实验原理
已经有7人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选
已经有9人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选
已经有8人回复
- 【求助/交流】蓝白斑筛选什么也不长
已经有16人回复
2楼2012-06-10 16:46:07
3楼2012-06-10 16:47:07
50