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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » （求助）蛋白质双向电泳胶显色后怎么会跑成这个样子。。。
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pangzikh

新虫 (初入文坛)

[交流] （求助）蛋白质双向电泳胶显色后怎么会跑成这个样子。。。

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求各路大神帮忙看下我的蛋白质双向电泳胶显色后怎么会跑成这个样子？是胶配的有问题吗？还是其他问题，求分析，谢谢~~~
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1楼2012-06-07 18:41:24
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lzh860801

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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pangzikh: 金币+5 2012-06-11 12:05:58
pangzikh: 回帖置顶 2012-06-11 12:17:14
银染的吧
上面是小分子 下面是大分子？
上样量太大 或者是你的蛋白有降解，基本只有高丰度的蛋白点啊。胶面看起来还是比较干净的，跑出来的点也基本没有横拖纵拖，所以一向的聚焦应该没什么问题。整个来说的话，如果LZ的样品蛋白点本来就不多，那么试着减少上样量 或是换其他染色方法试试，如果本来期待的蛋白点比较多，那么估计得改进蛋白提取方案，去高丰度或是换大胶了（我感觉LZ的象7cm的胶）。总的说来LZ聚焦问题不大 二向转的也可以，至于楼上说的那什么MARKer歪了，胶面大弧条，其实在2D中很常见也不重要。
加油，还是很有希望的！
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pangzikh
6楼2012-06-08 10:31:43
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秋日@恋歌

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得不是你染色的问题 而是配胶和点样的问题
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pangzikh
2楼2012-06-08 03:10:52
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439864925

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
pangzikh: 金币+3, 盐离子含量高，一般跑出来的二向应该是有拖尾和横纹吧 2012-06-11 12:04:41
marker是没问题的.可能是样品中盐离子含量过高
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3楼2012-06-08 07:10:17
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pangzikh

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
pangzikh: 回帖置顶 2012-06-08 09:47:24
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋日@恋歌 at 2012-06-08 03:10:52
我觉得不是你染色的问题 而是配胶和点样的问题

染色应该没问题，蛋白跑成什么样子，染色就染成什么样子。顶多就是染色深浅和背景颜色。所以说还是蛋白跑的有问题，你看maker都跑歪了。关于点样，我用的是胶条跑的是双向。等电聚焦有没有问题不好说，但二向肯定有问题，要么是胶配的有问题，要么是电泳过程有问题，还有一种可能是胶条和胶面结合不紧密。
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4楼2012-06-08 09:09:47
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