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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取问题
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yinyongtai

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA提取问题

本人提取油菜发育中的种子的总RNA，总共提取了20个样品，最后剩下了5个极品的样品，死活提取不出来，其中有两个每次提取后亮度很暗，几乎看不清楚，另外3个样品每次都是只有一条貌似降解的条带，各位高手帮忙看看啥原因呢？
20个样品都是-70下保存，用的invitrogen公司的Trizol

先谢过了
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1楼 2012-06-06 18:38:18
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microinsect

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助，很热心哦 2012-06-07 13:53:08
植物的RNA比较难弄一些！首先从你的图上看来，DNA残留太严重了，会影响你的RT-PCR的。建议用不含RNA酶的DNA酶消化一下。另外，你的RNA丰度也不好！我想可能是种子及发育过程中产生了一些物质，如酚、激素等等小分子物质，干扰了提取，建议用氯化锂法，自己配试剂提取，可能效果会好很多！
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2楼2012-06-07 08:24:49
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31569218

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个RNA不能用。你跑胶的时候换DEPC水做胶试试看。你的试剂是很好的试剂，应该是你提取过程没注意。。。。
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爱之深痛之切
3楼2012-06-07 08:58:14
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