应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒中插入21bp片段突变
31/1返回列表
查看: 1492  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bressze

木虫 (小有名气)

[求助] 质粒中插入21bp片段突变

我现在需要在原来质粒的基础上插入 21bp的片段，根据上游和下游的碱基分别有21个bp互补。所以引物一共是63bp，合成了互补的一对引物，Tm值在72℃。现在是想PCR得到突变质粒后DPN1酶切。结果PCR后取5ul电泳总是没有条带，只有引物二聚体出现。我的酶试过 ex taq ,la taq 及普通的taq结果都一样。

谢谢大家的帮忙，希望早点解决实验问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
加油生活哦
1楼 2012-06-06 13:27:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 18:57:52
21bp  ?!!   这个不大可行吧，我记得查过三个BP以上就难了，而且我也在做突变，就三个突变就各种二聚体了。。。
像你说这种引物应该只能P出二聚体了吧。。。。。因为引物的互补太强了，楼主看能不能把质粒切开，然后合一个引物往上加，之后再连上呢
赞一下 回复此楼
我会绕一个圈，走回到实验室
2楼2012-06-06 14:40:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzk234

禁虫
本帖内容被屏蔽
3楼2020-11-16 09:35:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bressze 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭