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beer胖

新虫 (小有名气)

[求助] 基因测序结果比对 已有2人参与

本人最近按照ncbi上blast 到的S288c菌株的一个基因设计引物,扩增了一株酿酒酵母的该基因,送样7个转化子进行测序,结果显示老是有个别基因与S288c的不一致:1.7kb的片段有12个单碱基不一致,核对了翻译的氨基酸,有四个氨基酸与S288c的不一致,而且这7个测序结果彼此也不一样。
我想问一下,这样的测序结果能不能认为与S288c的基因一致。
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yangbin1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-06 13:57:19
可能是扩怎是的问题,突变引起的,用高保真酶扩增会好一些。也可能是测序的问题。可以结合测序原始峰图再仔细看一下。其实有这点突变是很正常的。
4楼2012-06-06 13:56:05
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zboter

银虫 (正式写手)

你的7个测序结果都不一样,如何判断呢?呵呵。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-06-06 11:07:54
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beer胖

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zboter at 2012-06-06 11:07:54
你的7个测序结果都不一样,如何判断呢?呵呵。

能不能算作是实验或测序过程中的误差或突变
3楼2012-06-06 13:50:02
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kernim

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-07 10:12:04
这样是不行的,如果偶尔的几个碱基发生了突变但是没有导致氨基酸序列的改变的话还是可以的,但是如果碱基改变的太多以致氨基酸序列已经改变了的话载体构建算是不成功的,需要重新构建,用kod的酶保证性好。
5楼2014-03-06 21:06:26
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