24小时热门版块排行榜    

查看: 3038  |  回复: 10

lxlxyc

铜虫 (小有名气)

[求助] 定点突变PCR 用DpnI法

童鞋们有没有用DpnI法做过定点突变PCR的啊?请问一下以质粒作为模版,设计的引物必须反向互补吗?只有一部分重叠互补可以吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanjb1013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lxlxyc: 金币+1 2012-06-06 08:57:19
做过,我们的引物是包括你的突变位点,一共60个碱基,反向互补啊。
2楼2012-06-05 23:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxlxyc

铜虫 (小有名气)

完全反向互补吗?如果只overlap一部分不可以吗?
3楼2012-06-06 08:56:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxlxyc

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lanjb1013 at 2012-06-05 23:37:04
做过,我们的引物是包括你的突变位点,一共60个碱基,反向互补啊。

完全反向互补吗?如果只overlap一部分不可以吗?
4楼2012-06-06 08:57:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
5楼2012-06-17 07:33:07
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
6楼2012-06-17 07:33:47
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

soholj

至尊木虫 (著名写手)

有这个方法的原理吗?
7楼2012-06-29 12:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soholj

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 逐玉 at 2012-06-17 07:33:47
Tm值大于78度

有这个方法的原理吗?
8楼2012-06-29 12:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
9楼2012-06-30 16:52:10
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

jasminezhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 逐玉 at 2012-06-30 16:52:10
搜索一下QuikChange II Site-Directed Mutagenesis Kit的说明书,上面说的还算详细。中文的也有:碧云天的突变试剂盒说明书。很多的,需要的话,可以消息我。

我想请教一下用这个试剂盒做完之后进行转化,得到的克隆体对其进行挑取,提质粒,那么再送去测序之前需要对其进行检测吗?还是直接送去测序??谢谢
10楼2013-01-07 16:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lxlxyc 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 338求调剂 +4 18162027187 2026-03-02 5/250 2026-03-02 22:18 by sunny81
[考研] 290分材料工程085601求调剂 数二英一 +8 llx0610 2026-03-02 9/450 2026-03-02 22:09 by 无际的草原
[考研] 289求调剂 +3 BrightLL 2026-03-02 4/200 2026-03-02 21:17 by BrightLL
[考研] 085600求调剂 +4 LRZZZZZZ 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:33 by 云旗yunqi
[考研] 285求调剂 +9 满头大汗的学生 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:29 by hypershenger
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+5 ,!? 2026-03-02 7/350 2026-03-02 20:27 by hypershenger
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +9 吃宵夜1 2026-02-28 11/550 2026-03-02 20:14 by hypershenger
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[考研] 化学,材料,环境类求调剂 +7 考研版棒棒 2026-03-02 7/350 2026-03-02 19:56 by hypershenger
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 5/250 2026-03-02 19:19 by 轻松不少随
[考研] 材料085601调剂 +5 多多子. 2026-03-02 5/250 2026-03-02 19:15 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +3 好运连绵不绝 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:05 by zhukairuo
[考研] 化工京区271求调剂 +6 11ing 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:52 by caszguilin
[考研] 一志愿山东大学材料与化工325求调剂 +5 半截的诗0927 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:37 by 明亮9527
[考研] 299求调剂 +4 kkcoco25 2026-03-02 4/200 2026-03-02 18:04 by barlinike
[考研] 一志愿华南理工大学材料与化工326分,求调剂 +3 wujinrui1 2026-02-28 3/150 2026-03-02 16:36 by chuocheng
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +4 Qwertyuop 2026-03-01 4/200 2026-03-02 14:27 by 升格阿达
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +4 weizhong123 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:46 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
信息提示
请填处理意见