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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 定点突变PCR 用DpnI法
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)

[求助] 定点突变PCR 用DpnI法

童鞋们有没有用DpnI法做过定点突变PCR的啊？请问一下以质粒作为模版，设计的引物必须反向互补吗？只有一部分重叠互补可以吗？
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1楼 2012-06-05 21:48:28
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soholj

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 逐玉 at 2012-06-17 07:33:47
Tm值大于78度

有这个方法的原理吗?
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8楼2012-06-29 12:58:28
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lanjb1013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lxlxyc: 金币+1 2012-06-06 08:57:19
做过，我们的引物是包括你的突变位点，一共60个碱基，反向互补啊。
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2楼2012-06-05 23:37:04
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)
完全反向互补吗？如果只overlap一部分不可以吗？
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3楼2012-06-06 08:56:36
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lxlxyc

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lanjb1013 at 2012-06-05 23:37:04
做过，我们的引物是包括你的突变位点，一共60个碱基，反向互补啊。

完全反向互补吗？如果只overlap一部分不可以吗？
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4楼2012-06-06 08:57:05
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