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银虫 (小有名气)

[求助] 总RNA反转录

大家好，新手在此请教一个问题，怎样才能知道我从细胞中提取的总RNA成功的反转录成为CDNA，谢谢哈~

1楼 2012-06-05 21:02:18

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铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-06 13:42:12
821078607: 金币+5, ★有帮助, 谢谢哈~ 2012-06-07 20:19:34

我也有相同的疑问，看了好多，大多数都说，只要RNA没问题，反转录的cDNA基本上也没什么问题，或者你可以单跑cDNA，就是比较费，如果条带是弥散的，就说明成功了。再者你可以用β-actin跑个PCR，有条带的话，也说明反转录成功了。最后你可以设计RT引物，跑PCR，有条带的话，也是成功的。

2楼2012-06-05 22:03:01

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木虫 (小有名气)

★ ★
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821078607: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2012-06-07 20:20:04

我当初做的时候会测个紫外，看一下它呢260/280,有没有达到要求，然后是设计的RT-PCR的引物，进行PCR看有没有条带

3楼2012-06-06 09:54:03

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