24小时热门版块排行榜    

查看: 1363  |  回复: 10

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 25ml瓶中提取细胞RNA ,1mlTrizol ,OD比值为1.8 电泳的时候却看不到任何条带?

Sample TextSample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

加异丙醇沉淀离心后是否有可见沉淀?
A260的具体读数是多少?产量如何?
伟大航线....
2楼2012-06-05 16:23:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2012-06-05 16:23:39
加异丙醇沉淀离心后是否有可见沉淀?
A260的具体读数是多少?产量如何?

您好,加入异丙醇后看不到沉淀,A260为0.456,A280是0.249,上样的时候是加入了5ul和1ul loading buffer,电泳电压是190V,1.0%的琼脂糖凝胶,加入的Goldview为0.6ul。我想问一下,是不是细胞的量较少,RNA达不到检测量,或者是Goldview加的量太少了?
3楼2012-06-05 18:17:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
西瓜: 金币+3, 很热心哈 2012-06-06 19:01:27
A260是用什么紫外分光光度计测的?读数是 ng/ul? 测前是否稀释?
电泳时marker是怎样?
因为不知是你没提出来还是电泳的问题。
伟大航线....
4楼2012-06-06 17:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by longrna at 2012-06-06 17:04:34
A260是用什么紫外分光光度计测的?读数是 ng/ul? 测前是否稀释?
电泳时marker是怎样?
因为不知是你没提出来还是电泳的问题。

A260是Unico紫外分光光度计测的,稀释的倍数是20倍,用DEPC处理后水稀释,听一位师兄说要最好用酶标仪测,但是我们没有石英板,结果没法用。读数*20*40得出产量,单位是ug/ml。
5楼2012-06-06 23:01:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★
小丹木木: 金币+2, 热心的虫虫 2012-06-07 13:49:37
用一个已知浓度且有跑电泳检测过没问题的RNA和你现在提的一起同时电泳。
一般小孔的胶上样100-200ng;大孔400-500ng。
伟大航线....
6楼2012-06-07 08:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有测A230值吗?
有的时候A230值也很关键,
乱花渐欲迷人眼
7楼2012-06-07 22:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-08 14:13:24
1.8不代表你提出来的是RNA,有可能降解了的RNA混合着其他物质也能让数值变成1.8。一般情况,rna提取出来以后,1ul的RNA就会很亮。
8楼2012-06-08 00:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 我是小纯洁 at 2012-06-08 00:54:52
1.8不代表你提出来的是RNA,有可能降解了的RNA混合着其他物质也能让数值变成1.8。一般情况,rna提取出来以后,1ul的RNA就会很亮。

这我也表示同意,关键是电泳跑的不好,所以感觉比值是1.8也没有太大意义了
9楼2012-06-08 13:32:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wansanlian at 2012-06-07 22:22:14
有测A230值吗?
有的时候A230值也很关键,

这个没有测,我用是PC12细胞提取的,不知道是不是细胞株的问题???
10楼2012-06-08 13:32:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +4 呼呼呼。。。。 2026-03-17 4/200 2026-03-17 22:20 by 77Qi
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 求调剂,总分315,考的生物医药,一志愿湖南师范大学。调剂到任何专业都可以 +4 小丁想进步 2026-03-11 5/250 2026-03-17 16:05 by 外星文明
[考研] 085600材料与化工 +4 安全上岸! 2026-03-16 4/200 2026-03-17 14:02 by 勇敢太监王公公
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
信息提示
请填处理意见