24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1384  |  回复: 10

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 25ml瓶中提取细胞RNA ,1mlTrizol ,OD比值为1.8 电泳的时候却看不到任何条带?

Sample TextSample Text
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

加异丙醇沉淀离心后是否有可见沉淀?
A260的具体读数是多少?产量如何?
伟大航线....
2楼2012-06-05 16:23:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2012-06-05 16:23:39
加异丙醇沉淀离心后是否有可见沉淀?
A260的具体读数是多少?产量如何?

您好,加入异丙醇后看不到沉淀,A260为0.456,A280是0.249,上样的时候是加入了5ul和1ul loading buffer,电泳电压是190V,1.0%的琼脂糖凝胶,加入的Goldview为0.6ul。我想问一下,是不是细胞的量较少,RNA达不到检测量,或者是Goldview加的量太少了?
3楼2012-06-05 18:17:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
西瓜: 金币+3, 很热心哈 2012-06-06 19:01:27
A260是用什么紫外分光光度计测的?读数是 ng/ul? 测前是否稀释?
电泳时marker是怎样?
因为不知是你没提出来还是电泳的问题。
伟大航线....
4楼2012-06-06 17:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by longrna at 2012-06-06 17:04:34
A260是用什么紫外分光光度计测的?读数是 ng/ul? 测前是否稀释?
电泳时marker是怎样?
因为不知是你没提出来还是电泳的问题。

A260是Unico紫外分光光度计测的,稀释的倍数是20倍,用DEPC处理后水稀释,听一位师兄说要最好用酶标仪测,但是我们没有石英板,结果没法用。读数*20*40得出产量,单位是ug/ml。
5楼2012-06-06 23:01:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★
小丹木木: 金币+2, 热心的虫虫 2012-06-07 13:49:37
用一个已知浓度且有跑电泳检测过没问题的RNA和你现在提的一起同时电泳。
一般小孔的胶上样100-200ng;大孔400-500ng。
伟大航线....
6楼2012-06-07 08:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有测A230值吗?
有的时候A230值也很关键,
乱花渐欲迷人眼
7楼2012-06-07 22:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-08 14:13:24
1.8不代表你提出来的是RNA,有可能降解了的RNA混合着其他物质也能让数值变成1.8。一般情况,rna提取出来以后,1ul的RNA就会很亮。
8楼2012-06-08 00:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 我是小纯洁 at 2012-06-08 00:54:52
1.8不代表你提出来的是RNA,有可能降解了的RNA混合着其他物质也能让数值变成1.8。一般情况,rna提取出来以后,1ul的RNA就会很亮。

这我也表示同意,关键是电泳跑的不好,所以感觉比值是1.8也没有太大意义了
9楼2012-06-08 13:32:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wansanlian at 2012-06-07 22:22:14
有测A230值吗?
有的时候A230值也很关键,

这个没有测,我用是PC12细胞提取的,不知道是不是细胞株的问题???
10楼2012-06-08 13:32:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +5 无懈可击的巨人 2026-04-09 5/250 2026-04-09 14:22 by tanran115
[考研] 材料290调剂 +11 19112175282 2026-04-09 11/550 2026-04-09 14:22 by 蜗牛炮弹
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +8 won_qii 2026-04-07 8/400 2026-04-09 14:17 by Delta2012
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +3 双一流本科机械 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:41 by 土木硕士招生
[考研] 生物与医药273求调剂 +17 荔题南墙 2026-04-05 18/900 2026-04-08 19:12 by 我减肥1
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 283求调剂 +19 A child 2026-04-04 19/950 2026-04-08 14:26 by xingguangj
[考研] 一志愿211电子信息347求调剂 +3 554916 2026-04-03 3/150 2026-04-07 23:22 by 如若时光倒流
[考研] 化学调剂 +18 艾志恒 2026-04-03 19/950 2026-04-07 16:00 by 起飞的比熊1
[考研] 一志愿北京化工085600 310分求调剂 +20 0856材料与化工3 2026-04-04 22/1100 2026-04-07 15:14 by 上岸快快
[考研] 一志愿华中农业大学0710(A)初试329分 求调剂 +5 一名26考研生 2026-04-04 5/250 2026-04-07 08:54 by 18828373951
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
[考研] 生物学学硕求调剂:351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …~、王…~ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
[考研] 271分求调剂学校 +12 zph158488! 2026-04-02 13/650 2026-04-05 10:13 by lqwchd
[考研] 材料调剂 +9 革微桂 2026-04-04 9/450 2026-04-05 08:27 by 544594351
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 初试成绩337找调剂 +3 ??? ?. ? 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:43 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见