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czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 25ml瓶中提取细胞RNA ,1mlTrizol ,OD比值为1.8 电泳的时候却看不到任何条带?

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longrna

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
西瓜: 金币+3, 很热心哈 2012-06-06 19:01:27
A260是用什么紫外分光光度计测的?读数是 ng/ul? 测前是否稀释?
电泳时marker是怎样?
因为不知是你没提出来还是电泳的问题。
伟大航线....
4楼2012-06-06 17:04:34
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longrna

新虫 (正式写手)

加异丙醇沉淀离心后是否有可见沉淀?
A260的具体读数是多少?产量如何?
伟大航线....
2楼2012-06-05 16:23:39
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2012-06-05 16:23:39
加异丙醇沉淀离心后是否有可见沉淀?
A260的具体读数是多少?产量如何?

您好,加入异丙醇后看不到沉淀,A260为0.456,A280是0.249,上样的时候是加入了5ul和1ul loading buffer,电泳电压是190V,1.0%的琼脂糖凝胶,加入的Goldview为0.6ul。我想问一下,是不是细胞的量较少,RNA达不到检测量,或者是Goldview加的量太少了?
3楼2012-06-05 18:17:41
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czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by longrna at 2012-06-06 17:04:34
A260是用什么紫外分光光度计测的?读数是 ng/ul? 测前是否稀释?
电泳时marker是怎样?
因为不知是你没提出来还是电泳的问题。

A260是Unico紫外分光光度计测的,稀释的倍数是20倍,用DEPC处理后水稀释,听一位师兄说要最好用酶标仪测,但是我们没有石英板,结果没法用。读数*20*40得出产量,单位是ug/ml。
5楼2012-06-06 23:01:34
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