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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 反转录前 DNA 酶消化
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fmtzhangli

金虫 (小有名气)

[求助] 反转录前 DNA 酶消化

我克隆一段基因大约1800bp，先提取了RNA,RT-PCR测序后，发现含有内含子，可能是DNA污染了，打算用DNA酶消化一下，有没有哪位同学做过类似的实验，具体应该怎么做啊，消化后能不能RNA也降解了？请高手指点~

[ Last edited by fmtzhangli on 2012-5-31 at 11:43 ]
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1楼 2012-05-31 11:36:23
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-31 13:47:01
加1～2ul 的RNase-free DNase，37度消化5～15分钟（根据你DNA的量的多少），时间不要太长，否则容易RNA也降解了。有条件可以过柱子回收RNA，或者用酚氯仿抽提2遍，基本也可以把蛋白去尽。
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2楼2012-05-31 11:55:39
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