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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PAGE跑PCR产物总是有问题~~
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yuyitt

新虫 (初入文坛)

[求助] PAGE跑PCR产物总是有问题~~

我PCR出一段具有高度变异性的片段，类似于16s rDNA，长度分别为250bp(+-20bp)及 186bp(+-20bp),PCR产物跑1.5%琼脂糖没有任何问题，但是分辨率不高，因此想跑PAGE胶查看下是否正确，但是PAGE胶跑出来却是如下，很奇怪很奇怪，这尾巴拉的太长了吧。PAGE条件是70V，1.5h，8%胶。
下面是2个PAGE图：


但是跑琼脂糖电泳就没有问题，下面是琼脂糖胶：



[ Last edited by yuyitt on 2012-5-28 at 20:54 ]
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1楼 2012-05-28 20:53:13
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xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以试试用跟高浓度的琼脂糖凝胶，并减少上样量，于marker相比你加的明显多了，
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越学越无知
9楼2013-07-22 20:45:35
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-28 21:59:08
你用什么染得色？PAGE胶的银染效果有没有试过？
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2楼2012-05-28 21:14:11
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cxb-abc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你用什么染得色？PAGE胶的银染效果有没有试过？
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3楼2012-05-28 21:16:14
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yuyitt

新虫 (初入文坛)
西瓜: 回帖置顶 2012-05-28 21:59:20
引用回帖:
2楼: Originally posted by cxb-abc at 2012-05-28 21:14:11
你用什么染得色？PAGE胶的银染效果有没有试过？

sybr green I染色的。
关键是，marker没有任何问题，没有一点拖尾，但是PCR产物就有拖尾，很奇怪
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4楼2012-05-28 21:23:23
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