24小时热门版块排行榜    

查看: 1151  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lifei_dut

金虫 (小有名气)

[求助] 菌液PCR结果不正确

采用一对引物扩增序列重组后,用重组菌液进行PCR,希望获得相应的DNA序列。采用跟对扩引物相同的引物进行PCR实验,本来应该是570bp的条带只有200左右,不知道是什么原因?排除了药品的质量问题。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一度冰火

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
嗯,
1.菌液PCR时会有很多因素影响PCR的结果,可以试下对重组菌液进行质粒提取后在进行目的片段PCR。
2.还有可能你的重组质粒构建失败。
快来找我吧!
4楼2012-05-19 00:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 凌凌一直都很热心的哇 2012-05-18 15:28:38
我觉得首先还是专一性扩增的问题,引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。引物可以稍长些。
2楼2012-05-18 10:26:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

动力泉

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是引物没有设计好,可考虑重新合成引物
好好学习
3楼2012-05-18 20:35:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crazymouse66

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lifei_dut: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-09-20 16:18:12
是不是你在挑单菌落的时候挑的太少了,我们实验室一般要挑20个左右,这样才能保证在20个里有重组成功的。你菌液PCR出来只有200左右我觉得应该是质粒,你挑的菌落都是假阳性菌落,所以我建议以后挑菌落的时候多挑一些,虽然会麻烦一些,但是可以最大程度的保障实验结果。还有我觉得感受态的质量也会对实验记过产生一定影响。
5楼2012-05-19 09:12:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 14/700 2026-03-20 10:46 by EBSD
[考研] 材料080500调剂求收留 +6 一颗meteor 2026-03-13 6/300 2026-03-20 10:41 by EBSD
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 10:37 by EBSD
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-03-18 5/250 2026-03-20 09:00 by ZHANG0tao
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[教师之家] 焦虑 +9 水冰月月野兔 2026-03-13 13/650 2026-03-19 09:50 by otani
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
信息提示
请填处理意见