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lifei_dut

金虫 (小有名气)

[求助] 菌液PCR结果不正确

采用一对引物扩增序列重组后,用重组菌液进行PCR,希望获得相应的DNA序列。采用跟对扩引物相同的引物进行PCR实验,本来应该是570bp的条带只有200左右,不知道是什么原因?排除了药品的质量问题。
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+3, 凌凌一直都很热心的哇 2012-05-18 15:28:38
我觉得首先还是专一性扩增的问题,引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。引物可以稍长些。
2楼2012-05-18 10:26:51
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