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xulinan

木虫 (小有名气)

[求助] 测序重叠峰求助

大家好,最近构建的三个质粒送到上海生工测序,一周后收到结果说是全部出现重叠,无法测序
我送的是菌液,从沈阳到上海,三个重组质粒之前都做过单双酶切验证,其中2个完全正常,双酶切都有目的条带;有一个双酶切除了目的条带外还有点杂带,当时认为杂带是没切开的质粒。PCR也做了,三个质粒都扩增出相应的目的片段。
小弟第一次做这种实验,不知该如何处理,请有经验的高手指点下该如何解决。
另外,同时送去的还有另一个同学的两个质粒,结果他的也是这个问题(会不会是公司测的问题?也很可能是自己第一次做,有些地方疏忽了?)
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xulinan

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2012-05-13 21:00:42:
将菌液划线纯化下,再送去测序试试。
大量出现这个问题,也可能是公司的原因。

感谢建议,已经划线纯化了,准备酶切验证,然后直接把质粒给他们测试试
3楼2012-05-14 12:06:26
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xulinan: 金币+2, 有帮助, 感谢回复 2012-05-14 12:03:46
将菌液划线纯化下,再送去测序试试。
大量出现这个问题,也可能是公司的原因。
Thank-you,so-blue.
2楼2012-05-13 21:00:42
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