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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 快速酶可以不遵循推荐的体系吗？
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sayaya

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 快速酶可以不遵循推荐的体系吗？ 已有2人参与

请问各位高手，有关快速酶的问题。

Fermentas 的快速酶，推荐的体系是 1 ug DNA 加 1 ul 的酶到 20 ul 体系，酶切 5 分钟。
可不可以加更少的酶，把切的时间加长些呢？比如，20 ul 体系里面加 0.5 ul 的酶，切 10-15 分钟？会产生诸如星活性之类的问题吗？

请赐教，谢谢！
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panda73

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1楼 2012-05-02 09:41:09
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-02 18:51:22
只有过高的酶浓度才会导致星号活性，因为酶浓度过高就说明里面甘油的比例也相对加大，而高甘油浓度是导致星号活性的第一号原因。如果把酶浓度降低酶切时间肯定要延长的，估计要一个小时，不过那就不算是快切了，那还用快切酶干嘛。
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2楼2012-05-02 15:58:01
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panda73

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
你的思路是没问题的，但请注意不同的酶的具体用量还是有差别，具体参见不同的酶的单位定义或说明书。

[ Last edited by panda73 on 2012-5-2 at 21:34 ]
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3楼2012-05-02 21:32:54
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