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627455987

木虫 (小有名气)

[求助] 真菌的基因克隆与表达 为什么要去除内含子?

新手,求指教!!!
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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627455987: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-23 13:49:38
如果在大肠杆菌等原核微生物表达,需要使用RT-PCR或overlap PCR等方法去除内含子。如果在真菌中表达,可以不取出内含子的。祝顺利...
5楼2012-04-23 03:16:32
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yangchaoc

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励帮助解答,欢迎继续交流。 2012-04-21 20:38:38
627455987: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-21 21:23:24
真菌是真核生物,体外基因克隆没有体内的剪接模式,所以要直接去除内含子
一路走过
2楼2012-04-21 18:26:34
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renny-1

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
627455987: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-21 21:22:54
真菌的基因体外表达时,只有外显子参与转录翻译合成蛋白质,但是含有内含子会有所阻碍,又因不在体内,没有切除内含子的酶,所以必须切除内含子才能完成克隆基因的表达!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2012-04-21 18:37:31
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lmzxcom1

金虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2012-04-23 03:16:32
如果在大肠杆菌等原核微生物表达,需要使用RT-PCR或overlap PCR等方法去除内含子。如果在真菌中表达,可以不取出内含子的。祝顺利...

异源的真核生物之间,拼接mRNA的系统都一样么,会不会换了宿主就导致无法正常获得除去内含子的mRNA?
6楼2014-02-24 21:14:54
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