| 查看: 2709 | 回复: 11 | ||
[求助]
将一个基因的几段外显子拼在一起 已有8人参与
|
||
| 我通过PCR产物直接测序将一个基因的三段外显子测出来了，但是如何将这三段外显子拼起来，求指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有72人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
-
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展
已经有0人回复
-
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍
已经有0人回复
-
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何进行基因中外显子和内含子的分析
已经有11人回复
- 已知一个真菌全基因组如何分析它的内含子和外显子
已经有3人回复
- 哪位童鞋会画基因结构的比较图哇，比较内外显子的，范图已上，偶是新手，跪求了
已经有9人回复
- 【求助】用cDNA的ORF序列以基因组DNA为模板 做PCR 为何P不出其对应的基因组序列?
已经有8人回复
- 请问一个基因的第一外显子是从哪里开始的？
已经有3人回复
- 【求助/交流】一个基因的第一外显子包不包括5‘非翻译区呢？
已经有6人回复
Fleaves
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 18980.6
- 散金: 526
- 红花: 42
- 帖子: 2644
- 在线: 412.1小时
- 虫号: 1473397
- 注册: 2011-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
3楼2014-02-20 12:43:10
shiyiyaya
金虫 (正式写手)
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 1276.4
- 散金: 279
- 红花: 8
- 帖子: 301
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 871992
- 注册: 2009-10-14
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
2楼2014-02-20 11:54:53
Fleaves
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 100 (初中生)
- 金币: 18980.6
- 散金: 526
- 红花: 42
- 帖子: 2644
- 在线: 412.1小时
- 虫号: 1473397
- 注册: 2011-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
4楼2014-02-20 12:43:31
feilinshiji
银虫 (小有名气)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 336.9
- 红花: 2
- 帖子: 99
- 在线: 33.5小时
- 虫号: 1112545
- 注册: 2010-10-02
- 性别: GG
- 专业: 兽医免疫学
5楼2014-02-20 13:43:17
6楼2014-02-20 15:41:26
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
7楼2014-02-20 16:01:28
8楼2014-02-21 23:18:12
cs2951819
银虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 121.1
- 散金: 52
- 帖子: 55
- 在线: 64.8小时
- 虫号: 1199908
- 注册: 2011-02-07
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
9楼2014-02-22 08:47:37
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+5, 老版主热心！ 2014-02-22 12:49:23
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+5, 老版主热心！ 2014-02-22 12:49:23
|
Overlap PCR如果产物很长的话不容易做。做的话建议两两融合，同时融合三个片段会难很多。 个人更倾向于3楼的说法。提RNA，再反转录得到没有内含子的cDNA，然后用cDNA为模板直接扩增三个外显子。 如果技术成熟，都顺利的话，用cDNA扩增比Overlap PCR要快很多。当然，前者的试剂成本也高一点，但是得到的cDNA可以长期保存，也可以扩其他东西。不过我认为前者技术难度小一些，后者中间卡住的几率还是蛮高的。时间也是成本。 两者都是可行的，楼主结合自己对两种技术的掌握程度，还有实验室的情况选吧。 |
10楼2014-02-22 11:24:23