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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 将一个基因的几段外显子拼在一起
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黑猩猩

新虫 (初入文坛)

[求助] 将一个基因的几段外显子拼在一起 已有8人参与

我通过PCR产物直接测序将一个基因的三段外显子测出来了，但是如何将这三段外显子拼起来，求指教！
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1楼 2014-02-20 11:12:30
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grape_vine

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接在第一个和第三个外显子两端设计引物不就行了吗? 说实话,没看懂问题
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8楼2014-02-21 23:18:12
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shiyiyaya

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-22 12:48:45
使用overlap PCR。在几个外显子的连接处设计引物，能与前后两段完全互补。第一轮PCR结束之后，各取一点产物，再使用外侧的引物扩增。
祝好！
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2楼2014-02-20 11:54:53
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-02-22 12:49:47
提取RNA，用cDNA做模板
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2014-02-20 12:43:10
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shiyiyaya at 2014-02-20 11:54:53
使用overlap PCR。在几个外显子的连接处设计引物，能与前后两段完全互补。第一轮PCR结束之后，各取一点产物，再使用外侧的引物扩增。
祝好！

太麻烦了吧
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4楼2014-02-20 12:43:31
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