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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 关于酵母抗zeocin时间问题
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lyani

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于酵母抗zeocin时间问题

GS115本身是没有zeocin抗性的。
但是为了确保万无一失，我将GS115挑单菌落，30°C 摇16h，菌液在OD600为0.3左右，涂200ul于 YPD+zeocin（博来霉素终浓度为100ug/ml）上，30°C避光培养，但是72个小时就长了很小的菌落。是zeocin失效了，还是什么其他问题？还是我在涂板的时候就应该避光操作？
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1楼 2012-04-16 10:25:42
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一休陈

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 墨香若水 at 2012-04-16 10:32:33
涂板没必要避光操作，我以前都是用25-50ug/ml  可能菌体太浓的原因吧 也可能Z失效   直接挑单菌落画板看会不会长~

请问你以前是用博来霉素筛选酿酒酵母阳性克隆吗？博来霉素母液保存也是要低温冻存避光保存对吧？一般博来霉素多酿酒酵母阳性克隆的筛选工作浓度为25-50ug/ml?
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7楼2014-02-21 11:04:06
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墨香若水

木虫 (著名写手)
★
lyani(金币+1): 谢谢参与
涂板没必要避光操作，我以前都是用25-50ug/ml  可能菌体太浓的原因吧 也可能Z失效   直接挑单菌落画板看会不会长~
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2楼2012-04-16 10:32:33
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lyani

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 墨香若水 at 2012-04-16 10:32:33:
涂板没必要避光操作，我以前都是用25-50ug/ml  可能菌体太浓的原因吧 也可能Z失效   直接挑单菌落画板看会不会长~

谢谢。
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3楼2012-04-16 10:41:33
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元雪浈

银虫 (初入文坛)
★
lyani(金币+1): 谢谢参与
遇到和楼主相似的问题，我是将大肠杆菌划线与含zeocin的LB平板的，24小时不长，但是，36小时就长出来了很微小的菌落，是zecin长时间失效了么？我要挑选的是用于做电转化实验用的，在zeoxin上不长的菌，这可怎么挑 啊
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4楼2012-09-08 10:13:33
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