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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ACTB 内参P不出来
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decloud

木虫 (著名写手)

[求助] ACTB 内参P不出来

我们实验室的ACTB primer 是同学已经做过validation的。因为快用完了，我就按同样的序列定了新的primer，结果死也做不出来，CT值一直都是undetect。用的Qigen的试剂，买了也就一个月吧。。凌乱啊，这个pcr 太tricky了。。。。
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适则存乙，劳则忙乙，
1楼 2012-04-03 23:43:44
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-04 12:23:33
引用回帖:
3楼: Originally posted by decloud at 2012-04-04 04:47:43:
试剂，刚开始用旧的引物都是好的阿，，，

问题可能只在模板和引物上
先确定模板没有降解，模板降解很是令人头疼
如果换公司合成的引物，请重新找可靠公司合成引物吧
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Let God do with it as He wills
4楼2012-04-04 11:06:54
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-08 16:55:16
果断换试剂，换引物，重复三次都没出的话就不要浪费时间了，赶快换

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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我就是我
2楼2012-04-04 00:27:15
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decloud

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-04-03 04:27:15:
果断换试剂，换引物，重复三次都没出的话就不要浪费时间了，赶快换

试剂，刚开始用旧的引物都是好的阿，，，
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适则存乙，劳则忙乙，
3楼2012-04-04 04:47:43
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decloud

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-03 15:06:54:
问题可能只在模板和引物上
先确定模板没有降解，模板降解很是令人头疼
如果换公司合成的引物，请重新找可靠公司合成引物吧

模板是2周前合成的cDNA，一直放在-20， 引物一直用的invitrogen。。。
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适则存乙，劳则忙乙，
5楼2012-04-08 11:12:26
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