| 查看: 1964 | 回复: 8 | |||
[交流]
求基因敲除高手。。。。
|
|||
| 我基因敲除用的方法是同源重组，设计的上游同源臂测序之后发现有个别位点突变，请问影响基因敲除实验吗？会不会影响上游基因的表达？（上游基因的ORF与下游基因的ORF方向相同。） |
回复此楼» 猜你喜欢
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有118人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 多核现象的基因敲除
已经有9人回复
- 基因敲除细胞阳性纯和子筛选
已经有10人回复
- 丝状真菌的基因敲除
已经有7人回复
- 【求助/交流】枯草芽孢杆菌基因敲除~~
已经有9人回复
- 【求助/交流】基因敲除试验
已经有23人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母URA3基因敲除的问题
已经有30人回复
- 【求助/交流】求助：关于基因敲除后对下游基因的影响相关问题？
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教基因敲除问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】芽孢杆菌属的基因敲除方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】乳酸菌的酶基因敲除
已经有7人回复
- 【求助/交流】基因敲除问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】基因敲除时的同源双交换原理是什么？
已经有9人回复
- 【求助/交流】微生物基因敲除请进
已经有8人回复
★ ★ ★ ★
805085868(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+3, 回复很耐心啊~愚人节快乐O(∩_∩)O 2012-04-01 17:43:00
805085868(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+3, 回复很耐心啊~愚人节快乐O(∩_∩)O 2012-04-01 17:43:00
|
首先想问你测序的方式是什么？PCR产物直接测还是连到载体上再测？测的是双向还是单向？因为这些会影响测序结果的可信度。 其次，“个别位点突变”指的是只突变一个吗？如果同源臂较长，估计是不影响重组实验，但突变的位点会不会在重组体中那就不一定了，有机率在，也有机率不在。可以PCR包含上游同源臂的片断测序验证。 再次，如果筛选到的都有这个突变位点，会不会影响基因表达，要看突变的处于哪个位置。若在翻译区，会不会造成移码突变，若只是换了碱基，看蛋白序列改变了没；若在非翻译区，还在看是否改了启动子RBS等等，大概就是这样吧，说的不对的，请大家指正哈~ 愚人节快乐，不得不说小木虫太有才啦^-^ |
3楼2012-04-01 01:40:52
5楼2012-04-01 21:54:52
6楼2012-04-02 12:29:38
7楼2012-08-13 15:45:51
8楼2013-11-06 21:36:18
9楼2013-11-07 10:18:56
简单回复
__小朋友_2楼
2012-03-31 22:48
回复
805085868(金币+1): 谢谢参与
2012-04-01 10:16
回复
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西瓜: 金币-10, 违规存档, 广告 2012-04-01 17:43:19
西瓜: 编辑内容 2012-04-01 17:43
-- [ Last edited by 西瓜 on 2012-4-1 at 17:43 ]
西瓜: 金币-10, 违规存档, 广告 2012-04-01 17:43:19
西瓜: 编辑内容 2012-04-01 17:43
