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oceanworld

木虫 (小有名气)

[求助] 引物加保护碱基

各位大侠请问一下,我要做双酶切,设计了一对引物加了保护碱基和酶切位点,但是却扩增不出正确的目的片段,用没加保护碱基和酶切位点的引物能够扩增出正确的目的片段,请问这是怎么回事呢?下面是我设计的加了保护碱基和酶切位点的引物!谢谢各位了!


5’  CCGCTCGAGACTTTTGGCCAGCTGCCTCT 3’    xhoI
5’  CCCAAGCTTATCATCAACAGGGAACTGTTG 3’     HindIII
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ilaveu

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流!欢迎发表更多的见解! 2012-03-30 20:15:52
看着设计上没什么问题,如果引物没问题的话,应该能P出来才对
PCR有时候就是不稳定,高手也常常遇到P不出来的情况,换个条件就能出来
2楼2012-03-30 19:16:35
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