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lx19880717

金虫 (初入文坛)

[求助] pET-28a原核不能表达目的蛋白 已有2人参与

我在做原核表达的过程中,使用了pET-28a载体,Rosetta(DE3)表达菌株,但是37℃诱导表达后,连包涵体都没有看到,基本没有任何的蛋白表达,所以想请问一下大家,能不能帮我分析一下是什么原因?谢谢。
PS:我的目的蛋白大量重复序列,是否是由于重复序列导致蛋白在表达过程中无法折叠,如果是这个原因有什么办法可以解决,谢谢。
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lx19880717

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by wszhyd at 2012-03-12 16:58:46:
我也遇到楼主一样的问题,选用位点是Nco1 和Xho1 ,也是不表达,帮顶一下,希望高人指点一下。

呵呵,谢谢!
3楼2012-03-12 20:33:16
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