24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3731  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

865310007

木虫 (小有名气)


[交流] 内切酶和连接酶buffer的选择

体系中需要加入连接酶和内切酶,那buffer怎么办呢?两个buffer成分差不多,如果10微升体系,那buffer是各加1微升10*的,还是加一个就可以了呢?更或者说,每个都加0.5微升???
如果两个buffer都加的话,那溶液中盐离子浓度会不会太高了呢?会不会影响酶的活性?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dorecnu

木虫 (正式写手)



865310007(金币+1): 谢谢参与
请楼主先解释一下,您的实验目的是什么?为什么不酶切后回收片段,然后再连接。在避免了buffer不同的同时每一步都可以检测,便于后面设置连接反应。
5楼2012-03-12 12:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

j2

木虫 (正式写手)



865310007(金币+1): 谢谢参与
又连接又切???孤陋寡闻了,这是什么情况?
2楼2012-03-12 10:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jting0912

新虫 (初入文坛)



865310007(金币+1): 谢谢参与
应该先各自进行酶切,验证酶切成功后再连接吧~~~~~~~~~~~~~
3楼2012-03-12 11:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

865310007(金币+1): 谢谢参与
内切酶切完后,体系灭活,再用加连接酶连接吧,buffer可以共用,但是加连接酶时要额外加ATP提供能量。
4楼2012-03-12 11:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 309求调剂(一志愿湖南大学) +15 呆菇不是戴夫 2026-04-02 16/800 2026-04-08 21:45 by zhouxiaoyu
[考研] 一志愿南昌大学,085600,344分求调剂 +11 调剂上岸玘 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:17 by luoyongfeng
[考研] 283求调剂 +19 A child 2026-04-04 19/950 2026-04-08 14:26 by xingguangj
[考研] 求助071001调剂!!! +6 黄守松 2026-04-05 7/350 2026-04-08 11:54 by 猪会飞
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 353求调剂 +6 晴空万里air 2026-04-07 6/300 2026-04-08 10:06 by 不吃魚的貓
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +11 梁富贵险中求 2026-04-04 13/650 2026-04-06 07:24 by houyaoxu
[考研] 085500机械专硕初试288求调剂 +3 GZJguo666- 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:06 by jkddd
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 材料295 +13 小英11 2026-04-03 14/700 2026-04-04 09:02 by 来看流星雨10
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿复旦材料,英一专硕,总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 260求调剂 +6 朱芷琳 2026-04-02 6/300 2026-04-02 20:27 by 6781022
信息提示
请填处理意见