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865310007

木虫 (小有名气)

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[交流] 内切酶和连接酶buffer的选择

体系中需要加入连接酶和内切酶，那buffer怎么办呢？两个buffer成分差不多，如果10微升体系，那buffer是各加1微升10*的，还是加一个就可以了呢？更或者说，每个都加0.5微升？？？
如果两个buffer都加的话，那溶液中盐离子浓度会不会太高了呢？会不会影响酶的活性？

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1楼 2012-03-11 21:59:31

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dorecnu

木虫 (正式写手)

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★
865310007(金币+1): 谢谢参与

请楼主先解释一下，您的实验目的是什么？为什么不酶切后回收片段，然后再连接。在避免了buffer不同的同时每一步都可以检测，便于后面设置连接反应。

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