24小时热门版块排行榜    

查看: 3633  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

865310007

木虫 (小有名气)


[交流] 内切酶和连接酶buffer的选择

体系中需要加入连接酶和内切酶,那buffer怎么办呢?两个buffer成分差不多,如果10微升体系,那buffer是各加1微升10*的,还是加一个就可以了呢?更或者说,每个都加0.5微升???
如果两个buffer都加的话,那溶液中盐离子浓度会不会太高了呢?会不会影响酶的活性?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

865310007(金币+1): 谢谢参与
内切酶切完后,体系灭活,再用加连接酶连接吧,buffer可以共用,但是加连接酶时要额外加ATP提供能量。
4楼2012-03-12 11:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

j2

木虫 (正式写手)



865310007(金币+1): 谢谢参与
又连接又切???孤陋寡闻了,这是什么情况?
2楼2012-03-12 10:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jting0912

新虫 (初入文坛)



865310007(金币+1): 谢谢参与
应该先各自进行酶切,验证酶切成功后再连接吧~~~~~~~~~~~~~
3楼2012-03-12 11:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dorecnu

木虫 (正式写手)



865310007(金币+1): 谢谢参与
请楼主先解释一下,您的实验目的是什么?为什么不酶切后回收片段,然后再连接。在避免了buffer不同的同时每一步都可以检测,便于后面设置连接反应。
5楼2012-03-12 12:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
信息提示
请填处理意见