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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)


[交流] 合成一段DNA的问题?引物,PCR

想合成一段双链的DNA,大概50个BP,好像公司合的话价格稍高。
想设计成两段引物,想问下如果是两段互补DNA双链的话可以利用一定条件直接使其结合成双链吗?或是设计成两段有重叠的引物,互为模板,是否可行呢?条件大概怎么控制?
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
4楼: Originally posted by loveskyzhou at 2012-02-11 13:29:57:
重叠延伸就是两段引物重叠相互P吧,可是这样做的话很难找到合适的Tm值啊,如果重叠过长Tm太高怎么P ? 段的话又怕P不出来。。。。。

总厂才50bp,我有同学合成过70bp的引物,据说最后目的条带扩增成功,所以重叠可以适当的长一些。关键是PCR后的目的条带比较短,所以电泳分离就比较麻烦,如何保证最终的产物都是延伸完全的,这是个问题。
6楼2012-02-11 13:51:02
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)



loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
重叠延伸应该可行吧

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2楼2012-02-11 12:13:55
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wanhscn

木虫 (职业作家)



loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
运气好的话,理论上可行!
运气不好,还是得不到你想要的。
3楼2012-02-11 13:08:15
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)


送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by joan198108 at 2012-02-11 12:13:55:
重叠延伸应该可行吧

重叠延伸就是两段引物重叠相互P吧,可是这样做的话很难找到合适的Tm值啊,如果重叠过长Tm太高怎么P ? 段的话又怕P不出来。。。。。
4楼2012-02-11 13:29:57
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