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合成一段DNA的问题?引物,PCR
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loveskyzhou
铁虫
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虫号: 1346820
[交流]
合成一段DNA的问题?引物,PCR
想合成一段双链的DNA,大概50个BP,好像公司合的话价格稍高。
想设计成两段引物,想问下如果是两段互补DNA双链的话可以利用一定条件直接使其结合成双链吗?或是设计成两段有重叠的引物,互为模板,是否可行呢?条件大概怎么控制?
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1楼
2012-02-11 11:55:13
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生物一点点
新虫
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虫号: 1715853
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我说啊,就别那么折腾了,现有的基因合成技术很成熟价格也不高,那么点片段500大洋搞定了,何必去搞那些呢,就算你引物设计好啦,合成要50块钱吧,等你拿到货要2-3天时间吧,你摸条件需要消耗20大洋左右吧,结果还没出来一周时间没啦,就算你比较走运p出来的是你的目的条带,你也拿去车测序验证吧,片段太小还不能直接测序那需要做克隆吧200大洋有没啦,测序费需要25吧,合计一下:295,这是比较幸运的有1%的可能。要不成功重头再来一次,那就得花500多大洋啦。时间的损失呢老板可不会心疼你的。所以还直接扔给测序公司。。。。
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14楼
2012-03-25 19:38:13
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joan198108
铁杆木虫
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★
loveskyzhou(金币
+1
):谢谢参与
重叠延伸应该可行吧
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loveskyzhou
2楼
2012-02-11 12:13:55
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wanhscn
木虫
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★
loveskyzhou(金币
+1
):谢谢参与
运气好的话,理论上可行!
运气不好,还是得不到你想要的。
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3楼
2012-02-11 13:08:15
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loveskyzhou
铁虫
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Originally posted by
joan198108
at 2012-02-11 12:13:55:
重叠延伸应该可行吧
重叠延伸就是两段引物重叠相互P吧,可是这样做的话很难找到合适的Tm值啊,如果重叠过长Tm太高怎么P ? 段的话又怕P不出来。。。。。
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4楼
2012-02-11 13:29:57
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